胰岛素抵抗在血脂异常、心血管疾病和2型糖尿病中起主要作用。三号机房，哺乳动物琐事其染色体区域20p13-12与人类2型糖尿病相关的同源物通过抑制Akt磷酸化损害胰岛素信号，并在胰岛素抵抗小鼠模型中过度表达。我们这里报告说三号机房错义Q84R多态性显著(P（P）<0.05）与两个独立队列中的几个胰岛素抵抗相关异常相关(n个=178和n个=605），且716例2型糖尿病患者存在胰岛素抵抗相关的心血管危险因素簇（比值比3.1[95%可信区间1.2-8.2]，P（P）= 0.02). 在另外100名患有心肌缺血的2型糖尿病患者中，心肌缺血的年龄是渐进性的，且具有显著性(P（P）=0.03）从Q84Q降至Q84R至R84R个体。测试TRB3变体Q84或R84的功能作用三号机房在人HepG2肝癌细胞系中转染全长cDNA。与对照HepG2细胞相比，胰岛素诱导的序号473-Akt磷酸化在Q84-中减少了22%(P（P）与对照细胞相比<0.05），并且在R84转染的细胞中增加45%(P（P）<0.05 vs.Q84转染和P（P）与对照细胞相比<0.01）。这些数据提供了第一个证据三号机房基因在人类胰岛素抵抗和相关临床结果中起着作用。
胰岛素抵抗是血脂异常、心血管疾病（CVD）和2型糖尿病的致病因素(1). 环境和遗传因素都调节胰岛素抵抗，后者大多是未知的(2). Akt是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，是胰岛素信号传导的关键介质(三); Akt活性受损与胰岛素抵抗的人类和动物模型有关(4——6). 因此，Akt活性介质是胰岛素抵抗的候选因子(7). 新发现的三号机房基因（哺乳动物）琐事同源物，也称为TRIB3/NIPK，基因ID 57761）已被大多数人报道(8,9)，尽管不是全部(10)，通过结合和抑制Akt磷酸化来影响胰岛素作用并在胰岛素抵抗中发挥作用的研究(8,9).三号机房位于与2型糖尿病相关的20p13人类染色体区域(11,12).三号机房因此，是胰岛素抵抗的候选基因(7).
通过对TRB3编码区的重新排序，识别出五种错义变体和两种同义变体；四个是新的，三个已经从国家生物技术信息中心（NCBI）单核苷酸多态性数据库（dbSNP）中获得。未找到NCBI dbSNP中已有的另外两个同义变体(表1). 单倍型区组划分表明，三个次要等位基因频率（MAF）>5%的多态性（Q84R、Y111Y和A323A）没有聚集到一个区组中。在Y111Y和A323A之间观察到强烈但不完全的连锁不平衡（D′=0.67；第页2=0.4），留下未链接的错义Q84R变体。由于其MAF极低（四个错义）或其不太可能的生物学意义（两个同义词），只有普遍存在的错义Q84R变异体会导致极性非带电氨基酸被带电氨基酸取代，因此进一步测试其与胰岛素抵抗表型的关联。
我们对居住在罗马或周边地区的178名2型糖尿病患者的非糖尿病白种人无关后代进行Q84R多态性基因分型(表2). 用正常血糖-高胰岛素钳夹测定胰岛素敏感性(13)，从Q84Q降至Q84R和R84R个体。三种基因型的血清胰岛素、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇也有显著变化。当模型中加入腰围（而非BMI）时，血清胰岛素和HDL胆固醇的差异不再显著，因此表明脂肪分布可能会调节三号机房对一些胰岛素抵抗相关异常的影响。Q84R多态性和腰围在调节瘦糖处理率方面的相互作用也表明了这一点。事实上，Q84R和R84R中两个变量之间的预期负相关更强(第页分别为−0.47和−0.40）(第页=-0.13）个人(P（P）交互作用<0.05）。然后，我们对来自加尔加诺的605名不相关的非糖尿病高加索人的Q84R多态性进行了基因分型(表2). 三个基因型组的血清胰岛素水平（而非血脂水平）存在显著差异，R84R患者的胰岛素水平更高，与BMI和腰围无关。值得注意的是，第一批样本中的个体是2型糖尿病患者的后代，因此，由于环境和/或遗传因素，极易出现胰岛素抵抗(14). 可以假设，在如此强烈的不利背景下，R84变异体的单个拷贝（Q84R杂合个体携带）也足以确定胰岛素抵抗。第二个样本的情况似乎并非如此，该样本与普通人群相似，仅在纯合R84R个体中观察到胰岛素抵抗。胰岛素抵抗可能导致心血管疾病，尤其是在2型糖尿病患者中(15). 因此，我们研究了716名2型糖尿病患者(表3)来自加加诺地区，并根据存在胰岛素抵抗相关心血管危险因素，即腹部肥胖（女性腰围>88 cm，男性腰围>102 cm）对其进行分组，血脂异常（男性总胆固醇≥200 mg/dl和/或HDL胆固醇≤40 mg/dl，女性≤50 mg/dl；和/或甘油三酯≥150 mg/dl或目前正在接受降脂治疗），以及高血压（收缩压≥130 mmHg或舒张压≥85 mmHg，或目前正在进行降压治疗）。共有356名患者同时存在三种危险因素（高危亚组），而360名患者没有（两种或更少的危险因素）。高危组中R84R患者的比例较高（356例中的14例[3.9%]，360例中的7例[1.9%]；年龄和性别调整后的OR值3.1[95%可信区间1.2-8.2]，P（P）= 0.02). 第二个独立队列研究了100名患有心肌梗死的连续2型糖尿病患者(16)也进行了基因分型。心肌缺血年龄从Q84Q的58±9岁下降(n个=79）至55±10年（Q84R）(n个=18），R84R为47±11岁(n个=3）个人；P（P）=0.03，在校正以下三个与心肌缺血时年龄独立相关的临床变量后：性别(P（P）=0.03），高血压(P（P）=0.03）和血脂异常(P（P）= 0.05). 胰岛素抵抗也可能导致2型糖尿病(1). 因此，我们比较了三号机房上述716例2型糖尿病患者的Q84R基因型与330例无关非糖尿病对照受试者（空腹血糖<6.1 mmol/l的男性117例，女性213例，无已知影响糖脂代谢的药物，无全身疾病）在相同年龄段（35-76岁）他们是在同一地区（加尔加诺和周边地区）招募的，是之前描述的605名样本的一部分。504（70.4%）、191（26.7%）和21（2.9%）糖尿病患者和242（73.4%）、80（24.2%）和8（2.4%）对照个体分别携带Q84Q、Q84R和R84R基因型。观察到的84R携带者2型糖尿病风险增加的趋势，尽管与上述与胰岛素抵抗相关表型的关联相一致，但在目前的样本量中并不显著(P（P）= 0.61). 测试三号机房S上的变体473在人HepG2肝癌细胞系中转染Akt磷酸化、Q84或R84 TRB3全长cDNA。胰岛素诱导的S的逐渐减少473从未转染的对照到Q84-和R84-HepG2细胞观察到Akt磷酸化，Akt蛋白表达没有变化(图1A). 两种转染细胞的可比表达水平三号机房通过免疫沉淀和抗Myc抗体印迹在细胞裂解物中确定了变体(图1). 平均而言(n个=3个实验），胰岛素效应显著(P（P）<0.05）与对照细胞相比，Q84-HepG2减少了22%(图1B). 与Q84-HepG2相比，R84-HepG2细胞中的Akt磷酸化水平进一步降低了23%(图1B) (P（P）与Q84-HepG2和P（P）与对照细胞相比<0.01）。相反，在这些细胞系中，总Akt和抗Myc免疫沉淀蛋白的表达均未观察到显著变化三号机房(P（P）=0.57和P（P）分别通过单向方差分析=0.87；n个=3个实验）。我们在这里首次描述了三号机房基因（即R84）与几种胰岛素抵抗相关的异常有关，包括高胰岛素血症、血脂异常和心血管疾病。这种关联已在几个独立样本中得到证实，因此不太可能出现假阳性结果。在方差方面，至少就目前的样本量而言，没有发现与2型糖尿病有显著关联。与野生型Q84相比，R84变型引入了显著的电荷变化。此外，R84变异体对胰岛素刺激的Akt磷酸化有较强的抑制活性，这一发现为观察到的Q84R多态性与胰岛素抵抗之间的关联提供了令人信服的生物学解释。虽然为了更深入地了解其等位基因结构，当然还需要对基因调控区域的变异进行全面调查，而且需要进行几项大型研究，以更好地确定Q84R变异（以及可能的其他变异）在三号机房我们的初步研究结果强烈表明，R84变异体有助于确定胰岛素抵抗的复杂遗传背景，并可能有助于识别胰岛素抵抗风险和相关心血管风险的个体，这些个体的预防计划可以针对这些个体。
