摘要
谷氨酸是脑内主要的兴奋性神经递质,由于谷氨酸转运体在质膜中的作用,谷氨酸几乎只存在于细胞内。为了研究这些蛋白质的定位和性质,我们已经产生了特异性识别两种克隆的大鼠谷氨酸转运体GLT-1(Pines等人,1992)和GLAST(Storck等人,1992)序列部分的抗体。在免疫印迹上,针对GLT-1的抗体标记出一条宽的异质带,最大密度约为73kDa,而针对GLAST的抗体标记小脑中一条类似的宽带,约为66kDa并且在其他脑区低几千道尔顿。GLT-1在海马体、侧隔、大脑皮层和纹状体中的表达浓度最高,而GLAST优先在小脑的分子层表达。然而,这两种转运蛋白都存在于整个大脑中,并且在大脑半球和脑干中大致平行分布。预包埋光镜和电镜免疫细胞化学显示,GLT-1和GLAST均局限于星形胶质细胞,星形胶质细胞似乎同时表达这两种蛋白,但在大脑不同部位的比例不同。未观察到神经末梢标记。GLT-1和GLAST的氨基端和羧基端均位于细胞内,表明跨膜段的数量为偶数。针对与GLT-1拟议序列的氨基酸残基2-11相对应的合成肽的抗体识别天然大鼠大脑GLT-1蛋白,确认翻译起始位点位于第一个ATG。