通过转染含有雌激素反应元件的报告基因证明成骨细胞中的功能性雌激素受体

尽管在成骨细胞中可见少量雌激素受体（ER），但雌二醇（E₂)对成骨细胞有一些影响在体外，E的直接作用₂关于成骨细胞的研究尚未完全建立。为了确定成骨细胞中是否存在功能性ER，我们用含有氯霉素乙酰转移酶（CAT）报告基因和卵黄原蛋白A2基因中的雌激素反应元件（ERE）的质粒转染细胞。E类₂-在瞬时转染和随后用10–100 nM 17β-E处理48 h后测定CAT活性的依赖性诱导₂.17β-E₂，但不是17α-E₂二氢睾酮或孕酮在大鼠颅骨骨折-3、RCT-3、PyMS和UMR-106细胞以及人骨肉瘤细胞系SaOS-2/B-10中以剂量依赖性方式（最多6倍）诱导CAT活性。相反，E₂对成骨前细胞系RCT-1和TRAB-11、大鼠骨肉瘤细胞系ROS 17/2.8、成纤维细胞系BALB-c/3T3和NRK中CAT活性的诱导没有影响。使用猿病毒40基表达载体过度表达ER不仅可以增强或增强E₂-所有细胞类型中CAT的依赖性诱导，但增强E₂-胰岛素样生长因子-I和E的依赖性表达₂-分别刺激初级颅骨和PyMS成骨细胞的DNA合成。这些数据表明，在一些（但不是所有）成骨细胞中存在低水平的功能性内源性ER，并表明ER的丰度可能在E的作用中起限速作用₂在这些细胞上。