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岩藻激酶/L(左)-岩藻糖-1-P-鸟苷酰转移酶(FKP)是一种双功能酶,可转化L(左)-岩藻糖转化为Fuc-1-P,然后转化为GDP-L(左)-岩藻糖通过抢救途径。全长FKP(F-FKP)和C-末端截短FKP的分子量分别为105.7和71.7 kDa。在本研究中,表达并纯化了重组F-FKP和C-FKP。尺寸排除色谱实验和分析超速离心结果表明,F-FKP和C-FKP均为三聚体。天然F-FKP蛋白通过蒸汽扩散法结晶,晶体属于空间群P(P)212121并将同步辐射X射线衍射至3.7°分辨率。晶体单元-细胞参数为= 91.36,b条= 172.03,c(c)=358.86Å,α=β=γ=90.00°。用低温电子显微镜观察了F-FKP分子的三维特征。初步的低温电子显微镜实验表明,F-FKP分子是两个平行的圆盘状物体堆积在一起。将所有结果结合在一起,假设在一个不对称单元中有六个FKP分子,这对应于计算的马修斯系数2.19Da公司−1溶剂含量为43.83%。这些初步的晶体学和低温电镜分析提供了FKP的基本结构信息。

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