Purification, crystallization and preliminary X-ray diffraction of a disulfide cross-linked complex between bovine poly(A) polymerase and a chemically modified 15-mer oligo(A) RNA

Yang, Q.; Faucher, F.; Coseno, M.; Heckman, J.; Doublié, S.

doi:10.1107/S1744309110051110

牛聚（a）聚合酶和化学修饰的15聚寡核苷酸（a）RNA之间二硫键交联复合物的纯化、结晶和初步X射线衍射

聚（A）聚合酶（PAP）在信使RNA的3’末端合成聚腺嘌呤尾部。采用二硫键交联策略，在牛PAP（bPAP）和15聚寡核苷酸（A）之间获得复合物。所有七种内源性半胱氨酸均发生突变，以消除非特异性交联复合物。在几个不同的位置引入半胱氨酸残基，发现A152C可以实现最大的特定交联效率。得到的bPAP结构是活性的，当与化学修饰的RNA混合时，产生了bPAP-RNA复合物的晶体。属于太空群的晶体P（P）每个不对称单元含有两个蛋白-RNA复合物，X射线衍射分辨率为2.25º。

关键词：mRNA 3'加工;蛋白质-RNA复合物;聚（A）聚合酶;二硫化物交联;寡核苷酸（A）RNA.

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