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米拉比利斯抗病毒蛋白(MAP)是一种核糖体激活蛋白紫茉莉L.由于MAP对广泛的物种有效,因此该蛋白很难在异源宿主中表达,例如大肠杆菌最近,我们获得了一种MAP突变体Y72F,它对大肠杆菌核糖体同时对哺乳动物细胞保持几乎全部活性【Habuka、Miyano、Kataoka、Tsuge和Noma(1992)】。生物学杂志。化学。 267, 7758-7760]. 对于晶体学研究,Y72F MAP表达载体带有OmpA公司引导序列是在大肠杆菌然后从细胞培养基中分离纯化Y72F MAP突变体。使用天然MAP晶体的结晶条件生长晶体[Miyano. (1992).分子生物学杂志。 226,281-283]:含50 m的50%硫酸铵M(M)柠檬酸铵和2 mM(M)硫酸腺嘌呤,pH 5.4。晶体属于太空群P(P)121(或P(P)221)带有=b条=104.1和c(c)= 134.3 Å. 晶体与野生型晶体同晶,但衍射分辨率更高。Y72F突变体的成像板照片显示出尖锐的强烈斑点,而在天然晶体中没有观察到条纹。
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