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研究旨在评估二次谐波(SHG)用于选择性检测蛋白质和多肽晶体形成的优点和局限性,重点是结晶介质中存在的SHG活性盐的假阳性可能性。测定了蛋白质结晶常用盐的SHG活性,并与参考样品进行了定量比较。在所调查的19种盐中,有6种产生了显著的背景SHG,稀疏矩阵筛的96个孔中有15个在溶剂蒸发后产生SHG。SHG活性盐包括磷酸盐、水合硫酸盐、甲酸盐和酒石酸盐,而氯化物、醋酸盐和无水硫酸盐不产生可检测的SHG活性。识别出的SHG活性盐产生了一系列信号强度,几乎达到三个数量级。然而,即使是最弱的SHG活性盐也会产生比典型蛋白质晶体产生的信号大几个数量级的信号。一般来说,SHG活性盐可通过特征性强的SHG和可忽略的双光子激发紫外荧光(TPE-UVF)识别。例外情况包括含有磷酸二氢钾或甲酸铵的试验,这些试验产生了特别强烈的SHG,但残留的TPE-UVF信号较弱,这可能会使使用这些沉淀剂的结晶实验中的识别复杂化。

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