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传统低温EM样品制备的吸液时间使时间分辨研究复杂化,导致一些样品采用优先取向或在空气-水界面变性。在这里,我们可以看到,通过一个玻璃纤维过滤器将溶液喷到多孔低温电子显微镜格栅的一侧,通过格栅的另一侧(通常称为格栅的“背面”),可以使溶液通过格栅,从而产生适合玻璃化的膜。这个过程可以在几十毫秒内完成。在一个名为“Back-it-up”或BIU的高速样品制备装置中,将超声波样品应用和穿透式芯吸结合在一起。与自吸格栅相比,玻璃纤维的高液体吸收能力使得该方法对所施加的样品量相对不敏感。因此,穿透式芯吸产生了大面积的冰,适用于可溶性和洗涤剂-可溶性蛋白质复合物的冷冻EM。设备的速度增加了受首选方向影响的样本的视图数量。

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补充电影S2。

EMDB参考:脱铁蛋白,EMD-21951;血凝素,EMD-21954

PDB参考:脱铁蛋白,6wx6;血凝素,6wxb


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