大鼠睾丸血红素氧合酶-2的多个转录物：转录物和蛋白质的发育和细胞特异性调节¹

我们首次报道了睾丸中血红素氧合酶-2（HO-2）的表达受发育和细胞类型特异性因子的调节，并且我们描述了睾丸中存在三种独特大小的HO-2转录物。HO-2与HO-1（HSP32）一起催化血红素分子氧化裂解为胆绿素、一氧化碳和铁；HO-2是睾丸的主要同工酶。Northern blot分析显示大鼠睾丸中存在五种HO-2转录物；它们的长度从1.3到2.1公斤不等，主要信息为1.45-kb；其中三个转录本，~1.45kb、~1.7kb和~2.1kg，是睾丸特有的。其他两个约1.3 kb和约1.9 kb的转录物在包括睾丸在内的所有检查组织中都很常见。对从噬菌体λ中的大鼠文库中分离出的三个不同的cDNA进行分析表明，相对于通过编码区到HO-2基因中先前识别的两个poly（A）信号中的第一个的翻译起始，−37的所有cDNA都是相同的（McCoubrey和Maines，1994）。在−37上游，分离株的5′非翻译序列在长度和序列上都不同。与基因组序列的比较表明，多重转录物是通过选择性第一外显子的剪接以及选择性多聚（A）信号的使用而产生的。用特定于每个cDNA独特部分的探针进行北方杂交与这种解释一致。此外，与HO-1不同的是，HO-2信息是受发育调节的；在7日龄大鼠睾丸RNA中，仅检测到约1.3和1.9 kb的转录物。产后第28天观察到总信息水平显著增加，尽管该水平尚未达到成人睾丸中的显著放大。此外，当将第28天和成年睾丸与第7天睾丸进行比较时，转录物模式不同。在第7天的睾丸中没有非常显著的~1.45-kb带和~1.7-和2.1-kb带。血红素加氧酶活性和HO-2蛋白水平（通过Western blot评估）反映了RNA水平的增加。有趣的是，尽管原位杂交可以在精原细胞、精母细胞和精子细胞中检测到丰富的HO-2 mRNA，但免疫细胞化学只能在精子细胞中发现HO-2蛋白。这些观察结果证明了HO-2基因表达的组织和细胞特异性，并表明在睾丸中，HO-2的表达在转录和翻译水平上受到调节。