摘要

KRIT1是一种基于酵母与RAS家族GTPase RAP1A的双杂交相互作用而初步鉴定的蛋白质,它的突变与遗传性血管疾病脑海绵状畸形的发生有关(CCM1(中央控制模块1)). 由于KRIT1蛋白的功能及其在CCM发病机制中的作用尚不清楚,我们进行了酵母双杂交筛选,以确定其他蛋白结合伙伴。使用含有KRIT1的N-末端272个氨基酸残基的片段作为诱饵,该区域在数据库搜索时与任何已知蛋白质缺乏相似性。从人胎脑和HeLa cDNA文库的平行筛选中,我们获得了多个独立的人整合素胞质域相关蛋白-1(ICAP-1)分离物作为相互作用的克隆。GST-KRIT1从293T细胞中捕获内源性ICAP-1,证实了KRIT1和ICAP-1的相互作用。ICAP-1的α亚型是一种富含200氨基酸的丝氨酸/苏氨酸的磷酸蛋白,与β1整合素。我们证明了N-末端KRIT1 NPXY氨基酸序列的突变,该序列是ICAP-1与β结合的关键基序1整合素分子完全消除了KRIT1/ICAP-1相互作用。ICAP-1和KRIT1之间的相互作用,以及后者中FERM结构域的存在,表明KRIT1可能参与整合素分子和细胞骨架之间的双向信号传递。此外,这些数据表明,KRIT1可能通过整合素信号传导影响细胞粘附过程CCM1(中央控制模块1)发病机制。

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