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神经系统特异标记的转基因斑马鱼品系推荐

作者:谢训卫 发布时间:2019/10/10 5:00:00

斑马鱼是研究神经系统发育、功能和组织修复的理想模型,尤其是特异性表达荧光蛋白的转基因品系,帮助我们标记目标组织和细胞,可以清晰直观地观察到活体神经细胞的动态生物学过程。

国家斑马鱼资源中心现有各类研究用品系1400多种,其中转基因品系近200种。本文为大家推荐其中常用的几种神经系统标记品系。

双色荧光标记的斑马鱼神经系统

斑马鱼中枢神经系统自前段向后依次为:嗅球嗅球)、端脑(端脑)、间脑(间脑)、下丘脑(下丘脑)、视顶盖(视顶盖)、小脑(小脑)、后脑(菱脑)和延髓(髓质等基本结构,如下图所示。幼年期的斑马鱼大脑组织透明,且结构简单,可以作为优良的神经系统动物模型Shang等人,2015)。

斑马鱼神经系统(Grandel等人,2006年)

能全面标记中枢神经系统的品系首推捷克417(ihb304Tg,Tg(gad1b:mCherry)),该品系由gad1b启动子驱动红色荧光蛋白m樱桃色的表达。ad1b型是编码生成谷氨酸脱羧酶谷氨酸脱羧酶谷氨酸脱羧酶)亚型GAD67型的基因。谷氨酸脱羧酶负责催化谷氨酸谷氨酸盐的脱羧反应,产生γ-氨基丁酸γ-氨基丁酸GABA公司)和二氧化碳GABA公司是起抑制性作用的神经递质,因此gad1b启动子通常是作为抑制性神经元的特异性启动子。gad1b型基因的表达谱很广,从嗅球嗅球)、视顶盖(视顶盖)、眼睛(眼睛)、延髓(延髓长圆形)和脊髓(脊髓都可以观察到红色荧光蛋白的表达Song等人,2017年)。

CZ417,ihb304Tg,Tg(gad1b:mCherry)(歌曲等,2017年)

捷克413(tsu33Tg,Tg1型(弹性3:YFP))捷克160(knu3Tg(克),Tg(千克)(弹性3:EGFP))分别使用神经发育标记基因弹性体3的启动子驱动YFP公司EGFP公司的表达,在全身的神经元中特异表达标记基因。e(电子)第三层基因别名胡克最早在果蝇中发现,该基因缺失会导致视觉神经系统缺陷伴随神经系统发育不良,严重致死。刚过原肠期,埃拉夫3基因开始在分布在中线两侧的神经元中表达,神经系统二次发育开始不久,埃拉夫3基因表达急剧上升。e(电子)第三层在斑马鱼早期神经发育过程中发挥了重要的作用,是神经系统发育的重要标记基因Lyons等人,2003年;赵等,2006;Wu等人,2018年)。

CZ413tsu33Tg,Tg1(弹性3:YFP)(Wu等人,2018)

CZ413,tsu33Tg,Tg1(弹性3:YFP)

  

CZ160、,knu3Tg(克),Tg(弹性3:EGFP)

CZ154号(vu19Tg,Tg(千克)(olig2:DsRed2))转基因利用红色荧光蛋白DsRed2标记运动神经元和头部少突胶质细胞群。在神经系统发育过程中,放射状胶质细胞既是神经元的前身,也充当着新生神经元迁移的支架。槽口信号通路在放射状胶质细胞的维持中发挥了重要的作用,同时抑制其形成运动神经元,促进其向少突胶质细胞分化Kim等人,2008年)。放射状胶质细胞在发育中的中枢神经系统中居要角,扮演引导神经元迁移的角色。缺少胶质细胞的胚胎中,运动神经元会偏离预定迁移轨迹,向脊髓外迁移,形成异常的轴突投射Kucenas等人,2008年)。

CZ154中,vu19Tg,g(olig2:DsRed2)

捷克224(nju1Tg,Tg(千克)(cyp26a1:EYFP(P)))转基因品系由cyp26a1基因一段2.5千字节的启动子驱动EYFP公司标记基因的表达,表达部位主要分布在视网膜、嗅球、背侧脊髓前部、后肠、脊索后部和咽弓等组织中胡等,2008)。cyp26a1基因是细胞色素第450页家族成员, 相对应的产物为第26周期氧化酶,可以和视黄醛脱氢酶视黄醛脱氢酶乳酸脱氢酶1a2号机组基因产物)共同协调维持视黄酸无线电高度表的均衡状态。视黄酸参与了细胞增殖和凋亡、细胞分化和组织形态等多个重要的生理功能中,对机体的视觉、皮肤、免疫、生殖和神经系统等都有一定的影响。

CZ224,nju1Tg,Tg(cyp26a1:EYFP)   

对特异单一神经相关组织感兴趣的朋友可以关注捷克25(Tg(千克)(OTM:dGFP公司)ihb27Tg,标记中脑组织)捷克31(Tg(千克)(-1.0pomca:GFP)兹弗44Tg,标记脑垂体)捷克36(Tg(千克)(-2.5 tshb:EGFP)ihb5Tg,标记松果体)CZ151(Tg(千克)(ompb:tau-eGFP)jt0012Tg,标记嗅球)153捷克元(Tg(千克)(百万英镑:表皮生长因子p)包装1Tg标记成髓鞘胶质细胞)CZ353号(Tg(千克)(原子能机构1a:d番茄)nns8Tg,标记小脑组织)CZ415号(Tg(千克)(晶体1:CFP)t吨su24Tg,标记晶状体)等品系。

标记单一特异神经组织的品系

还有很多有意思的品系在这里就不一一赘述了,有兴趣的朋友请点击品系列表的捷克号就可以进入品系信息页面了解啦。未来中心的全体员工将继续努力以为斑马鱼研究团队提供更好的科研支撑。

捷克ID

基因型

建造

注释

捷克25

ihb27Tg/+

 Tg(OTM:GFP)

最佳Tcf基序,TOP驱动GFP表达,中脑GFP

捷克31

zf44吨/+

 Tg(-1.0pomca:GFP)

垂体

捷克36

ihb5毫克/+

 Tg(-2.5tshb:EGFP)

垂体/松果体/甲状腺

77捷克元

Tg(atoh7:Gal4);Tg(UAS:mcherry)

Tg(atoh7:Gal4);Tg(UAS:mcherry)

视网膜神经节细胞

CZ78公司

cf2千克/+

 Tg(弹性3:YC2)

神经元,视网膜

CZ79号

ml3克/+

 Tg(mnx1:mGFP)

初级运动轴突,运动神经元

CZ81号

rw0Tg(千克)/+

 Tg(isl1:GFP)

颅运动神经元

CZ82公司

zf147吨/+

 Tg(apoeb:LY-EGFP)

神经元

捷克86

千卡66Tg/+

Tg(h2afva:h2afva-GFP)

神经肥大原基迁移,后侧线神经发育

150捷克元

电路2Tg/+

Tg(eef1a1l1:凯德)

大脑,孵化腺

CZ151号

jt0012Tg/+

 Tg(ompb:tau-EGFP)

嗅球、嗅板

153捷克元

ck1千克/+

 Tg(百万磅:埃及镑)

髓鞘神经胶质,中枢神经系统

CZ154号

vu19Tg/+

 Tg(olig2:DsRed2)

少突胶质细胞,运动神经元

CZ159号

Tg(mbp:mGFP)

时间(mbp:mGFP)

髓鞘神经胶质

捷克160

knu3Tg(克)/+

 Tg(弹性3:EGFP)

神经元,神经系统

CZ162号

Tg(if46:GAL4-VP16;UAS:nfsB-mCherry)

Tg(if46:GAL4-VP16;UAS:nfsB-mCherry)

眼睛、前肾管、脊髓

捷克224

nju1Tg/+

Tg(cyp26a1:EYFP)

视网膜,嗅泡,前部脊髓背侧、直肠、脊索尾侧、咽弓

CZ353号

年8月8日/+

Tg(atoh1a:d番茄)

小脑

CZ354号

nl1Tg/+

TgBAC(神经系统1:EGFP)

颅神经节,侧线神经细胞

捷克355

um14Tg/+

Tg(EPV.Tp1-Mu.Hbb:EGFP)

缺口反应组织,如发育中的中枢神经系统、血管系统、肝脏、肠道和胰腺

捷克413

Tg(huc:YFP)/+

Tg1(延迟3:YFP)

神经元

CZ415号

Tg(晶体1:CFP)/+

Tg(晶体1:CFP)

目镜

捷克417

ihb304Tg/+

Tg(gad1b:mCherry)

嗅窝、视顶盖,延髓、眼睛、脊髓

神经系统特异表达的转基因斑马鱼品系(直接点接捷克号即可进入相应品系信息页面)

参考文献

1、尚春芳、穆毅、杜佳丽。斑马鱼潜入神经科学研究:透明中的可见思维大脑。SCIENTIA SINICA Vitae,2015,45:223–236,doi:10.1360/N052014-00203
2.Grandel H、Kaslin J、Ganz J等。神经干细胞与神经发生成年斑马鱼大脑:起源、增殖动力学、迁移和细胞命运。发育生物学,2006,295(1):263-277。
3.宋毅、陶斌、陈杰、。,Jia,S.,Zhu,Z.,Trudeau,V.L.,Hu,W.(2017)GABA能神经元及其斑马鱼GnRH3的调节作用。内分泌学。158(4):874-886
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8.Kim H、Shin J、Kim S等。槽口桡侧胶质细胞对少突胶质细胞的调控斑马鱼胚胎脊髓[J]。发展动力:官员美国解剖学家协会出版,2008,237(8):2081-2089。
9.里昂·D·A、盖伊·A·T、克拉克·J·DW.通过多轮分裂监测神经祖细胞的命运完整的脊椎动物大脑[J]。发展,2003,130(15):3427-3436。
10.胡,P.,田,M.,鲍,J。,Xing,G.,Gu,X.,Gao,X.、Linney,E.和Zhao,Q.(2008)维甲酸调节斑马鱼cyp26a1启动子。开发动态。237(12):3798-3808


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