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通过定点突变、稳态动力学分析和晶体学研究，研究了Tyr 108的羟基在人谷胱甘肽转移酶P1-1催化机制中的可能作用。已经使用了三种具有代表性的共基质，即乙炔酸、7-氯-4-硝基苯-2-氧杂-1,3-二唑和1-氯-2,4-二硝基苯。在乙炔酸存在下，酶遵循快速平衡随机双bi机制，并在添加底物后和产品释放前发生速率限制步骤。用Phe替换Tyr 108可使k（cat）减少14倍，但不会明显改变H位点对底物的亲和力。在这种情况下，羟基功能的作用似乎是稳定化学步骤的过渡状态，即GSH到亲电底物的Michael加成。结晶数据与该结论相一致，该结论表明Y108的羟基位于乙炔酸酮部分的氢键距离中[Oakley，A.J.，Rossjohn，J.，Lo Bello，M.，Caccuri，A.M.，Federici，G.，&Parker，M.W.（1997）《生物化学》36，576-585]。此外，在Y108F突变体和野生型之间没有观察到结构差异，这表明羟基的去除是活性丧失的唯一原因。在7-氯-4-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑与谷胱甘肽的催化共轭中，Tyr 108的参与有所不同，其中速率限制步骤具有物理性质，可能是三元络合物的结构转变。Tyr 108的取代产生约7倍的k（cat）增加量和恒定的k（cat）/Km（NBD-Cl）值。7-氯-4-硝基苯-2-氧杂-1，3-二唑和Tyr 108之间缺乏关键氢键似乎是k（cat）增加的基础。在1-氯-2,4-二硝基苯/GSH体系中，Y108F突变体的动力学参数没有明显变化。我们得出结论，Y108在谷胱甘肽转移酶P1-1催化中具有多功能作用，这取决于亲电共基质的性质。

Tyr 108在人谷胱甘肽转移酶P1-1催化机制中的多功能作用。Y108F突变酶的结晶和动力学研究。，Lo Bello M、Oakley AJ、Battistoni A、Mazzetti AP、Nuccetelli M、Mazzarese G、Rossjohn J、Parker MW、Ricci G生化。1997年5月20日；36(20):6207-17. PMID:9166793^[2]

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