第三阶段

PubMed出版物摘要

Rtms5是一种深蓝色弱荧光GFP-like蛋白（[公式：见正文]，592 nm；[公式：参见正文]，630 nm；Phi（F），0.004），包含（66）Gln-Tyr-Gly发色团三肽序列。我们研究了两种变体Rtms5（Y67F）和Rtms5Y67F/H146S的光学性质和结构，其中67位的酪氨酸被苯丙氨酸取代。与母体蛋白相比，这些新变体的光谱明显蓝移。Rtms5（Y67F）光谱由两种吸收物质（[公式：见正文]，440 nm和513 nm）和绿色荧光发射（[公式，见正文]相对较高的荧光量子产率（Phi（F，）0.75；【公式：见正文】，440nm；【公式：见正文】，508 nm）。在pH值（3-11）范围内，每个变体的荧光发射都非常稳定。这是第一批绿色发光的类GFP蛋白（500-520 nm），在67位没有酪氨酸。每种蛋白质的X射线晶体结构测定为2.2 A分辨率，表明发色团的苄胺环类似于Rtms5亲本的4-羟基苄胺圈，是非共面的，并且是反式构象。化学量子计算的结果和结构数据表明，Rtms5（Y67F）中513nm的吸收物种是由在酰基胺氧处质子化的发色团的一种不寻常形式引起的。这是荧光蛋白的第一个X射线晶体结构，其功能生色团在67位含有苯丙氨酸。

一种含有QFG三肽发色团的绿色荧光蛋白：光学特性和X射线晶体结构。，Battad JM、Traore DA、Byres E、Rossjohn J、Devenish RJ、Olsen S、Wilce MC、Prescott M PLoS One。2012;7（10）：e47331。doi:10.1371/journal.pone.0047331。Epub 2012年10月10日。PMID:23071789^[2]

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