Plexin-B2 Mediates Physiologic and Pathologic Functions of Angiogenin

doi:10.1016/j.cell.2017.10.005

.2017年11月2日；171（4）：849-864.e25。

doi:10.1016/j.cell.2017.10.005。

Plexin-B2介导血管生成素的生理和病理功能

附属公司

¹美国马萨诸塞州波士顿华盛顿街800号塔夫茨医学中心分子肿瘤研究所，邮编02111；哈佛医学院病理学系，地址：77 Avenue Louis Pasteur，Boston，MA 02115，USA。
²美国马萨诸塞州波士顿华盛顿街800号塔夫茨医学中心分子肿瘤研究所，邮编02111；美国马萨诸塞州波士顿哈里森大道145号塔夫茨大学萨克勒生物医学研究生院细胞和分子生理学研究生课程，邮编02111。
^三哈佛医学院病理学系，地址：77 Avenue Louis Pasteur，Boston，MA 02115，USA。
⁴美国马萨诸塞州波士顿华盛顿街800号塔夫茨医学中心分子肿瘤研究所，邮编02111；塔夫茨大学萨克勒生物医学研究生院生物化学研究生课程，美国马萨诸塞州波士顿哈里森大道145号，邮编02111。
⁵分子肿瘤学研究所，塔夫茨医学中心，美国马萨诸塞州波士顿华盛顿街800号，邮编02111。
⁶美国纽约州纽约市麦迪逊大道1425号西奈山伊坎医学院神经科学系，邮编：10029。
⁷美国马萨诸塞州波士顿华盛顿街800号塔夫茨医学中心分子肿瘤研究所，邮编02111；哈佛医学院病理学系，地址：77 Avenue Louis Pasteur，Boston，MA 02115，USA；塔夫茨大学萨克勒生物医学研究生院细胞和分子生理学研究生项目，美国马萨诸塞州波士顿哈里森大道145号，邮编02111；塔夫茨大学萨克勒生物医学研究生院生物化学研究生课程，美国马萨诸塞州波士顿哈里森大道145号，邮编02111。电子地址：guo-fu.hu@tufts.edu。

PMID： 29100074
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内政部： 2016年10月10日/j.cell.2017.10.005

Plexin-B2介导血管生成素的生理和病理功能

余文浩等。单元格. 2017.

.2017年11月2日；171（4）：849-864.e25。

doi:10.1016/j.cell.2017.10.005。

作者

附属公司

¹美国马萨诸塞州波士顿华盛顿街800号塔夫茨医学中心分子肿瘤研究所，邮编02111；哈佛医学院病理学系，地址：77 Avenue Louis Pasteur，Boston，MA 02115，USA。
²美国马萨诸塞州波士顿华盛顿街800号塔夫茨医学中心分子肿瘤研究所，邮编02111；美国马萨诸塞州波士顿哈里森大道145号塔夫茨大学萨克勒生物医学研究生院细胞和分子生理学研究生课程，邮编02111。
^三哈佛医学院病理学系，地址：77 Avenue Louis Pasteur，Boston，MA 02115，USA。
⁴美国马萨诸塞州波士顿华盛顿街800号塔夫茨医学中心分子肿瘤研究所，邮编02111；塔夫茨大学萨克勒生物医学研究生院生物化学研究生课程，美国马萨诸塞州波士顿哈里森大道145号，邮编02111。
⁵美国马萨诸塞州波士顿华盛顿街800号塔夫茨医学中心分子肿瘤研究所，邮编02111。
⁶美国纽约州纽约市麦迪逊大道1425号西奈山伊坎医学院神经科学系，邮编：10029。
⁷美国马萨诸塞州波士顿华盛顿街800号塔夫茨医学中心分子肿瘤研究所，邮编02111；哈佛医学院病理学系，地址：77 Avenue Louis Pasteur，Boston，MA 02115，USA；塔夫茨大学萨克勒生物医学研究生院细胞和分子生理学研究生课程，美国马萨诸塞州波士顿哈里森大道145号，邮编02111；塔夫茨大学萨克勒生物医学研究生院生物化学研究生课程，美国马萨诸塞州波士顿哈里森大道145号，邮编02111。电子地址：guo-fu.hu@tufts.edu。

PMID： 29100074
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摘要

血管生成素（ANG）是一种分泌型核糖核酸酶（RNase），在生长、存活和再生中具有细胞类型和环境特异性作用。尽管这些功能需要受体介导的内吞作用和适当的亚细胞定位，但细胞表面受体的身份仍不明确。在这里，我们表明，丛蛋白B2（PLXNB2）是血管内皮细胞、癌症、神经元、正常造血和白血病干细胞和祖细胞中血管紧张素的功能受体。从机制上讲，PLXNB2介导细胞内RNA处理，有助于ANG的细胞生长、存活和再生能力。针对PLXNB1上ANG结合位点产生的抗体在体外和体内限制ANG活性，从而抑制已建立的异种移植瘤、ANG诱导的神经发生和神经保护，造血干细胞和患者源性白血病干细胞和祖细胞中的前自我更新转录物水平，减少体内白血病的进展。因此，PLXNB2对ANG的生理和病理功能是必需的，在实体癌、造血癌和神经退行性疾病中具有显著的治疗潜力。

PubMed免责声明

数字

**图1。PLXNB2与ANG结合并调节其生物活性**
（A）的绑定¹²⁵I-ANG至LNCaP细胞表面。（B）绑定数据的Scatchard图。（C） ANG-Sepharose上LNCaP细胞质膜组分的亲和层析（第2道）。将灭活的Sepharose用作对照（通道1）。用可溶性ANG（0.1 mg/ml）孵育以显示特异性（通道3）。（D）亲和纯化带的质谱分析显示，共有15个肽（来自2个实验）与PLXNB2相匹配。（E） RT-PCR分析*PLXNB2系列*在不同细胞密度下培养的LNCaP细胞和HUVEC中的mRNA。（F） LNCaP细胞表面PLXNB2的中频检测。箭头表示PLXNB2染色。比例尺=10μm。（G）在Biacore T200上分析ANG与PLXNB2 Sema结构域结合的SPR分析。（H） ANG与PLXNB2的ECD和Sema结构域以及PLXNB3 ECD结合的ELISA分析（n=3）。（一） RNASE4与PLXNB2和PLXNB3结合的ELISA分析（n=3）。（J） ANG-Flag和PLXNB2的Co-IP。（K）对照组和2组PLXNB2的免疫印迹*PLXNB2系列*敲除LNCaP细胞系。（五十）血管紧张素核移位减少*PLXNB2系列*击倒LNCaP细胞。核ANG用箭头表示。比例尺=20μm。（M）击倒*PLXNB2系列*在LNCaP细胞中消除了ANG诱导的增殖。在无1μg/ml ANG的情况下，在无酚、无红、碳/右旋糖酐处理的FBS中培养细胞。N=5。（N）击倒*PLXNB2系列*LNCaP细胞中抑制ANG诱导的AKT和ERK磷酸化以及47S rRNA转录。（O）击倒*PLXNB2系列*抑制ANG介导的tiRNA生成（n=5）。（P）击倒*PLXNB2系列*ANG对血清饥饿诱导的细胞凋亡具有保护作用（n=5）。另请参见图S1、S2和S3。

**图2。PLXNB2作为功能性ANG受体的特性**
（A）检测*PLXNB2系列*转染对照载体（pCI-Neo）或人COS-7细胞中的mRNA和蛋白*PLXNB2系列*cDNA（pCI-PLXNB2）。（B）*PLXNB2系列*转染使ANG能够在COS-7细胞中进行核转位。核ANG用箭头表示。比例尺=20μm。（C）血管紧张素诱导的AKT磷酸化*PLXNB2系列*而不是COS-7细胞的载体转染物。（D）人的RT-PCR分析*PLXNB1系列*,*PLXNB2系列*、和*PLXNB3系列*COS-7细胞转染体中的mRNA。（E） ANG在转染COS-7细胞中转位*PLXNB2系列*但在那些转染了*PLXNB2系列*或*PLXNB3系列*.比例尺=40μm。（F）生物素化ANG与细胞表面的结合*PLXNB1系列*,*PLXNB2系列*、和*PLXNB3系列*COS-7细胞转染物（n=5）。（G）转染不同缺失突变体的COS-7细胞ANG的核转位*PLXNB2系列*.Mut1，Sema域名被删除；删除了Mut2、PSI和IPT域；删除了Mut3、Sema和PSI域；删除了Mut4、Sema和IPT域。核能ANG用箭头表示。比例尺=20μm。（H）通过平衡透析测定ANG和PLXNB2肽的解离常数。（一） PLXNB2肽对ANG紫外吸收的影响通过差分光谱测定（n=3）。（J） PLXNB2肽与ANG变体R66A、N68D和H13A（n=3）之间结合的ELISA分析。（K）血管紧张素结合肽hplb2-15-06和PLXNB2的Sema结构域抑制血管内皮细胞中血管紧张素的核转位。核ANG用箭头表示。比例尺=20μm。（五十） PLXNB2的ANG结合肽抑制ANG诱导的HUVEC小管形成。比例尺=100μm。管状结构被计数并以条形图表示。所示数据为平均值±SD（n=3）。另请参见图S4。

**图3。PLXNB2 ANG结合位点的单克隆抗体抑制ANG的生物活性和肿瘤生长**
（A） SPR分析mAb17与PLXNB2的结合。（B）流式细胞术分析mAb17-与LNCaP细胞表面的结合。（C） mAb17在生长条件下抑制LNCaP细胞中ANG的核转位。核ANG用箭头表示。比例尺=20μm。（D） mAb17抑制应激状态下LNCaP细胞ANG的SG定位。SG ANG用箭头表示。比例尺=20μm。（E） mAb17抑制ANG和VEGF诱导的HUVEC小管形成。比例尺=100μm。（F） mAb17剂量依赖性地抑制LNCaP增殖。（G） mAb17阻止了PC-3异种移植物在无胸腺小鼠中的建立（n=12）。（H） mAb17抑制已建立的PC-3异种移植瘤在无胸腺小鼠中的生长。当肿瘤达到200mm时开始治疗^三（n=6-12）。（I-J）mAb17被抑制体内肿瘤细胞增殖（I，n=6）和血管生成（J，n=5）。比例尺=200μm。（K）靶向肿瘤组织的系统传递mAb17。PBS和mAb17处理小鼠的肿瘤组织用小鼠IgG染色。比例尺=10μm。（五十） mAb17治疗阻断肿瘤细胞ANG核转位体内.核ANG用箭头表示。比例尺=50μm。（百万）体内mAb17的处理抑制了肿瘤组织中的rRNA转录，如核仁组织区（NOR）的数量减少所示。比例尺=10μm。所示数字为每个细胞核NOR点的平均值±标准差（n=20）。另请参见图S5和S6。

**图4。PLXNB2 mAb17抑制ANG的神经活动**
（A） mAb17对P19细胞中小鼠PLXNB2的IF检测。比例尺=10μm。（B） mAb17对P19细胞增殖的剂量依赖性抑制（n=5）。（C） mAb17对ANG抗血清饥饿诱导凋亡保护活性的影响。所示数据为Annexin V阳性细胞百分比的平均值±SD（n=5）。（D）在生长条件下，mAb17抑制P19细胞ANG的核转位。核ANG用箭头表示。比例尺=10μm。（E） mAb17抑制应激下P19细胞ANG的SG定位。SG ANG用箭头表示。比例尺=10μm。（F） mAb17抑制P19细胞中ANG刺激的AKT、S6K、Rac和Cdc42激活。（G） mAb17抑制了血管紧张素刺激的P19细胞神经球的形成。比例尺=250μm（n=3）。（H-I）mAb17抑制了P19细胞（H）中ANG刺激的突起生长和小鼠胚胎皮层神经元（I）的神经丝延伸。比例尺=10μm（H）和250μm（I）（n=20）。（J-K）mAb17可阻断ANG对小鼠胚胎皮层神经元（J）和P19-衍生神经元（K）应激诱导的神经丝断裂的保护作用。B27诱导神经丝，并在ANG或ANG加mAb17的情况下承受低温应激（16°C）。箭头表示神经丝断裂。比例尺=200μm（J）和10μm（K）（n=20）。

**图5。ANG通过PLXNB2调节原始造血细胞特性**
（A） Mx1特异性HSPC细胞周期状态的量化*Plxnb2型^−/−*小鼠（n=9）。（B）全骨髓细胞（n=2）的连续重镀集落分析。每次重新电镀时添加ANG。（C）使用Mx1特异性移植的实验方案*Plxnb2型^−/−*作为捐赠者的整个BM。（D） Mx1特异性竞争性移植后的多谱系供体细胞嵌合*Plxnb2型^−/−*捐赠者（n=5）。（E-F）ANG（0.3μg/ml）调节WT的LT-HSC增殖（E，n=3）和促自我更新转录物（F，n=3），但不调节Mx1特异性*Plxnb2型^−/−*老鼠。（G） mAb17处理的WT或*安（Ang）^−/−*小鼠（n=6）。（H-I）第7天的细胞密度（H，n=3）和来自分类WT或*安（Ang）^−/−*在0.3μg/ml ANG和/或50μg/ml mAb17存在下培养LT-HSC。（J-K）第7天的细胞密度（J，n=3）或来自分类WT或*安（Ang）^−/−*在0.3μg/ml Sema4C和/或50μg/ml mAb17存在下培养LT-HSC。（五十）使用分选的WT LT-HSC进行移植的实验方案，该分选的WT-LT-HSC与0.3μg/ml ANG、50μg/ml mAb17或两者均培养7天。（M） ANG和/或mAb17处理的WT-LT-HSC供体竞争性移植后的多线供体细胞嵌合（n=6）。另请参见图S7。

**图6。ANG-PLXNB2对蛋白质合成的细胞类型特异性调节**
（A-B）WT和Mx1特异性MyePro细胞周期状态的量化*Plxnb2型^−/−*（A，n=9）和mAb17处理的WT或*安（Ang）^−/−*小鼠（B，n=6）。WT或Mx1特异性ANG治疗2 h后的（C-D）OP-Puro掺入*Plxnb2型^−/−*HSPC和MyePro适用于所有阶段（C，n=4）或G0/G1阶段（D，n=4）的细胞。（E） WT或Mx1特异性ANG治疗2h后rRNA的qRT-PCR分析*Plxnb2型^−/−*HSPC和MyePro（n=3）。（F-G）Mx1特异性小RNA的产生*Plxnb2型^−/−*HSPC（F，n=2）或WT HSPC经0.3μg/ml ANG、50μg/ml mAb17或两者（g，n=2）处理。

**图7。ANG-PLXNB2调节白血病干细胞特性**
（A） PLXNB2在非恶性对照组和慢性和急变期CML患者骨髓抽吸物中的白血病干/祖细胞中的表达（n=3-4）。（B）分选的白血病干/祖细胞（CD34）前自我更新转录物的qRT-PCR分析⁺CD38型⁻和CD34⁺CD38型⁺)和分化细胞（CD34⁻CD38型⁻)在0.3μg/ml ANG和/或50μg/ml mAb17存在下培养2天（n=3）。（C） CML患者和非恶性对照受试者在0.3μg/ml ANG、50μg/ml mAb17或两者的存在下培养的骨髓细胞集落形成（n=3）。（D） BCR-ABL小鼠模型的实验方案。（E-G）GFP量化⁺PB（E）和GFP中的髓细胞频率⁺LKS（F）或GFP⁺mAb17处理小鼠骨髓中的MyePro（G）数（n=5-6）。

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1. Fett JW，Strydom DJ，Lobb RR，Alderman EM，Bethune JL，Riordan JF，Vallee BL.血管生成素（一种来自人类癌细胞的血管生成蛋白）的分离和表征。生物化学。1985;24:5480–5486.-公共医学

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[2] Daviaud N，Chen K，Huang Y，Friedel RH，Zou H。丛蛋白B1和-B2双缺失突变体的皮层神经发生受损。开发神经生物学。2016;76:882–899.-公共医学

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[9] Fett JW，Strydom DJ，Lobb RR，Alderman EM，Bethune JL，Riordan JF，Vallee BL.血管生成素（一种来自人类癌细胞的血管生成蛋白）的分离和表征。生物化学。1985;24:5480–5486.-公共医学

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