图2

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有针对性地中断第1天外显子1与被废除的RNA和蛋白质表达相关。(A) 南部分析第1天轨迹。野生型(+/+)、杂合型(+/−)和纯合型(−/−)新生尾巴DNA用一、 进行凝胶电泳,并转移到尼龙膜上。过滤器与第1天外显子1探针(图。(图1A),1A) ,清洗并暴露于胶片中。随后,将过滤器剥离并杂交到3′第1天探针(材料和方法)。(B和C)E10野生型和纯合突变胚胎的整体原位杂交。第1天反义核糖探针与野生型胚胎中眼睛、四肢、神经管和大脑的转录物杂交(B),而纯合突变体中未检测到这种模式(C)(11). 该核糖探针对应于位于外显子1下游的编码序列,因此在突变等位基因中没有被删除。在颜色发育后,从动物身上取下尾巴进行PCR基因分型。(D和E)E12.5野生型和纯合突变眼切片的免疫组织化学分析。在野生型眼睛(D)中,Dach1抗体显示周边视网膜、视网膜色素上皮和正在发育的角膜中的蛋白质表达,而在纯合子突变眼(E)中,Dech1染色降低到背景水平。晶状体和表面外胚层染色是由于二级抗体的背景染色。