图5。

磷酸化和钙对AKAP79靶向结构域F-actin结合的调控²⁺-钙调素结合。A类钙对AKAP79（1–153）F-actin结合的调节²⁺–钙。如图所示，将AKAP79（1–153）培养10分钟(+)或不含（−）CaM（1μ米)，加利福尼亚州²⁺(100 μ米)或EGTA（5米米)在通过共沉淀分析F-actin结合之前。B类，通过PKC磷酸化调节AKAP79（1–153）F-actin结合。在通过共沉淀测定F-肌动蛋白结合之前，AKAP79（1-153）被PKC磷酸化。对照孵育在没有激酶的情况下进行。C、，Ca之间的竞争²⁺–AKAP79（1–153）靶向结构域的CaM结合和PKC磷酸化。AKAP79（1–153）被[γ−³²P] ATP通过PKC(控制)，含Ca²⁺–存在CaM或CaM和EGTA。D类，先前与F-actin孵育通过PKC磷酸化和Ca抑制AKAP79（1–153）F-actin结合的调节²⁺–CaM绑定。在顶部面板，AKAP79（1–153）在与F-actin孵育前被PKC磷酸化(肌动蛋白2; 如中所示B类)或先用F-actin孵育，然后用PKC孵育(肌动蛋白1)然后检测F-actin共沉积。在底部面板，AKAP79（1–153）靶向结构域片段也与钙孵育²⁺–与F-actin孵育前的CaM(肌动蛋白2; 如中所示A类)或者先用F-actin孵育，然后用Ca孵育²⁺–CaM公司(肌动蛋白1)然后检测F-actin共沉积。所示数据代表了至少三个独立实验的结果。A类,B类、和D类是免疫印迹(IB公司:);C是自动放射自显影(第32页).