图3

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基因标记突变体是可逆的,可以类似于基因敲除。

()高通量测序管道中绘制的所有基因陷阱整合位点的分布。(b条)逆转录病毒基因捕捉载体示意图,包括平行液氧磷重组位点和品红箭头指示PCR分析的引物位点(顶部)。用逆转录病毒编码和他莫昔芬诱导的Cre重组酶感染克隆4天后的基因组DNA PCR分析。使用亲本KBM7细胞作为PCR特异性的阴性对照(C)。SA,剪接受体;LTR,长终端重复。(c(c))用基因陷阱阻断p53表达的KBM7细胞进行Western blot,用Cre重组酶治疗和不治疗。亲代KBM7细胞被用作p53表达的对照。(d日)来自指定克隆的mRNA的RT-PCR分析。设计位于整合位点两侧的外显子PCR引物(如右图所示),用于从顶部所示的突变体中扩增cDNA。(e(电子))所示克隆的Western blot分析。每个抗体识别的抗原显示在右侧。