图4:

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同工酶特异性PKCα的活性和功能由C末端PDZ结合结构域定义

A) 经典PKC同工酶结构域示意图。PS:假底物,C1:DAG结合域,C2:钙结合域,C3:ATP结合位点,C4:底物结合域。V1–V5:同工酶之间同源性较低的区域。显示了三种经典同工酶V5的C末端部分的氨基酸序列。显示了PDZ结合图案。

B) ITRACK传感器中用于面板D-G的eGFP标记的PKC构建物示意图。供体构建物包括eGFP标签的PKCα(WT)或无PDZ结合域PKCα和PKCγ的缺失突变体(ΔQSAV),或含有从PKCα添加到C末端的PDZ结合结构域的嵌合PKCγ(+QSAV。

C) ITRACK测量的非老化触发平均值(显示平均值和SEM(阴影),n[神经元/脊髓]=PKCαWT:5/28,PKCαΔQSAV:8/39,PKCγWT:4/30,PKC伽玛+QSAV:6/35)。

D) (C、平均值和SEM)中峰值易位的量化。双向方差分析对QSAV结构域的存在显著(F(1128)=11.81,p=0.0008)。Sidak的多重比较测试。

E) 过度表达eGFP标记的PKCαΔQSAV的PKCαKO动物(n[神经元/棘]=6/17)或过度表达eGFP标记的PKCγ+QSAV的PKCαKO神经元(n=4/13)的棘sLTP的平均时程。显示平均值和SEM(阴影)。

F) 对仅过度表达eGFP的PKCαKO小鼠(PKCαKO:n[神经元/棘]=4/12)、eGFP标记的PKC a WT(n=5/14)、PKCαΔQSAV(如E所示)、PKC-γWT(n=3/10)、PKC+QSAV。误差条代表SEM。通过QSAV域的存在,双向方差分析显著(F(1,49)=14.63,p=0.0004)。Sidak的多重比较测试。