图1：

A） ITRACK传感器设计。供体：经典PKC同工酶被标记为mEGFP。受体：mCh靶向具有K-CAAX结构域的膜。

B） IDOCKS传感器设计。供体：经典PKC同工酶被标记为mEGFP。受体：PKCα/β的假底物结构域被2mCh荧光团标记。

C） 表达ITRACKα或ITRACK-α阴性的HeLa细胞的代表性荧光寿命图像（参见图S1A)μM）激活PKC前后。较暖的颜色表示寿命缩短，PKCα活性增加（（E）中的量化）。比例尺=20μm。

D） 与C中相同，但细胞表达IDOCKSα或IDOCKSα阴性（（E）中的定量）。

E） PKCα传感器在PdBU（1μM）和离子霉素（1μM）或载体刺激下荧光寿命变化的平均时间过程（n[实验/细胞]：Veh=6/30，ITRACKα=7/37，ITRACKαneg=5/28，IDOCKSα=6/29，IDOCKSαneg=6/36，阴影区域表示SEM）。

F） 如图所示，HeLa细胞中PKCα（以E表示）、PKCβ和PKCγ的ITRACK和IDOCKS药物诱导荧光寿命变化的定量（n[实验/细胞]：ITRACK-β=6/29，IDOCKS-β=7/44，ITRACK-γ=6/30，IDOCKSγ=6/27，条形表示平均值，SEM符号表示单个细胞）。

G） 在PdBu（1μM）和NMDA（20μM）刺激前或2分钟后，表达ITRACKα或IDOCKSα的CA1海马神经元次级顶树突的代表性荧光寿命图像。比例尺=2μm。

H） 如图所示，量化神经元中PKCα、PKCβ和PKCγ的ITRACK和IDOCKS药物诱导荧光寿命变化（n[实验/神经元]=5/5，Bars表示平均值和SEM，符号表示单个神经元）。