扩展数据图3

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将CPR-4识别为RIBE因子

a、,使用来自N2动物的全培养基、>10kD分数和<10kD UV-CM分数和UV-Ctrl治疗ced-1(e1735)生殖细胞尸体分析中的动物图1b数据为平均值±标准偏差。性腺臂的得分显示在横杆内。b、,通过RNAi筛选将CPR-4识别为RIBE因子。从RNAi处理的动物制备的UV-Ctrl和UV-CM用于治疗ced-1(e1735)动物。将UV-Ctrl处理下的生殖细胞平均尸体数减去UV-CM处理下的平均生殖细胞尸体数,计算生殖细胞尸体减少数(y轴)。在候选基因中eft-3型,ubq-2号机组行动-1导致强烈的胚胎致死性,我们无法获得它们的UV-CMhis-1型,他的-4his-71号导致部分胚胎死亡。在每个RNAi实验中对20个性腺臂进行评分。c中,照射后,进入UV-CM的CPR-4:::标记的分泌大大减少cep-1(gk138)携带P单拷贝整合的动物cpr-4::cpr-4::标志与携带相同P的辐照N2动物相比cpr-4::cpr-4::标志转基因。使用Flag表位抗体对来自指示菌株的浓缩UV-CM或UV-control(1μg/μL)进行免疫印迹分析。d中,0.27μM重组人组织蛋白酶B(rhCTSB)或2.8μM重组tCPR-4蛋白的蛋白酶活性如图2b数据为平均值±标准偏差(每次分析中n=6)。e中,使用0.27μM的rhCTSB或缓冲对照物处理ced-1(e1735)动物。在rhCTSB缓冲液中培养的动物比在tCPR-4缓冲液中生长缓慢,生殖细胞尸体更少。数据为平均值±标准偏差(每次分析n=21)。48小时后对生殖细胞尸体进行评分(a、 b、e). ***<0.001,“ns”,无显著性,双侧,未配对t吨测试(a、 e(电子)). 有关凝胶源数据,请参见补充图1.