图6

死亡信号刺激PACS-2介导的Bid转运至线粒体(A类)上图：GST-PACS-2FBR与他的₆-使用抗Bid抗体通过Western blot检测Bid、tBid和结合Bid分子。底部：GST-PACS-2FBR与His₆-Bid或CK2-磷酸化His₆-投标并约束他的₆-使用抗Bid抗体通过Western blot检测Bid。(B类)用1.2μM STS或0.1μg/ml Fas Ab和5μg/ml环己酰亚胺处理或不处理对照HeLa细胞或表达PACS-2-ha的细胞2小时。从细胞裂解物中免疫沉淀PACS-2-ha，并使用抗Bid抗体通过Western blot检测共免疫沉淀Bid(C类)MCF-7:Bid-GFP细胞要么用PACS-2 siRNA转染48小时，要么单独感染Ad:trans（trans，表达tet反式激活因子），要么与Ad:PACS-2一起感染24小时，然后用Fas-Ab（1μg/ml）和环己酰亚胺（20μg/ml。对固定细胞进行Fas-Ab介导的Bid-GFP向线粒体的募集评分。顶部：标准化为对照的条形图（Oligofectamine）。中间：荧光显微镜显示在各种条件下Bid-GFP和有丝分裂跟踪器（红色）染色。对含有150–450个细胞的大范围盖玻片的GFP-Bid移位到线粒体进行评分。底部：Fas Ab刺激PACS-2和Bid移位至线粒体。MCF-7:Bid-GFP经Fas-Ab处理2小时后进行免疫荧光显微镜检查。(D类)顶部：转染对照（scr.）或PACS-2 siRNAs的HeLa细胞经Fas Ab（1μg/ml）和环己酰亚胺（20μg/ml。