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2012年12月4日在线发布。 数字对象标识:2012-1182年10月21日

表1。

用于GATA-RE、D-LIRE、D-LIREmut1-2-3和SAP多重聚合的寡核苷酸

寡核苷酸引物序列
GATA-RE理念5′-CTAGACT公司TGATA公司CACAAAAG公司TGATA公司CTGCTAGC公司-3′
GATA-RE反义5′-TCGAGCTAGCAG公司TTATCA公司CTTTGTG公司TTATCA公司AGT公司-3′
D-LIRE感测5′-克他加他TAAT公司GGAAGCAAG公司塔特GG公司TAAT公司C类TGATA公司CGCTAGC公司-3′
D-LIRE反义5′-TCGAG标签TTATCA公司G公司ATTA公司CCA公司ATTA公司CTTTGCTTCC公司ATTA公司周转时间-3′
D-LIREmut感测5′-CTAGATAT公司总费用TGGAAGCAAGT公司计算机断层扫描TTGG公司AAT公司TCTGATACGCTAGC公司-3′
D-LIREmut反义5′-TCGAGCTAGCGTTATCAGA公司ATT公司CCAAGACTTTGCTTCCAGAAAT公司-3′
SAP意识5′-CTCTAGA公司GGGTACAGTTACTT公司GCTAGCAGAATTCAG公司-3′
SAP反义5′-GTGACCTGAATTCTGCTAGC公司AAGTGTAACTGTACCC公司TCTAGAGGTAC公司-3′

的兼容站点Xba公司I(TCTAGA)和Nhe公司I(GCTAGC)限制性内切酶用于寡核苷酸序列的多重聚合。这个Xba公司我和Xho公司首次使用I(CTCGAG)位点将2×GATA-RE序列插入pGEM修饰的载体,该载体在5′至3′方向上,Hin公司dIII,Xba公司我,Xho公司一、 和千磅I站点。然后用切割得到的2×GATA-RE pGEM载体Nhe公司我和Xho公司我插入第二份GATA-RE双链寡核苷酸。然后用切割得到的4XGATA-RE pGEM载体Hin公司dIII和千磅将I和含有4XGATA-RE的片段插入pLucPrl公司矢量。同样的方法用于D-LIRE和D-LIREmut1-2-3的多重聚合。对于SAP,重组的双链寡核苷酸具有额外的3′和5′突起千磅I(GGTACC)和B类tEII(GTGACC)端分别允许直接插入千磅我/英国标准时间pLuc中的EII站点格纳尔接收矢量。然后对pGEM载体进行如上所述的多重聚合。响应元素位于大胆的; D-LIREmut1-2-3内的突变包括下划线的