图6。

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与GATA2相比,LIM-HD蛋白LHX3和ISL1刺激−994/−960区域的启动子活性。A、 LHX3和ISL1刺激−994/−960区域的启动子活性。包含−994/−960区域多聚体或在三个TAAT基序(mut1-2-3)上突变的等效序列的荧光素酶结构体(参见图5A) 与LHX3和ISL1表达载体共转染(黑色条)或等量的pcDNA3空向量(白色条)转化为CHO细胞。转染后40 h测量相对荧光素酶活性,如材料和方法结果为平均值±标准偏差至少进行三次独立实验,一式三份。B、 LHX3的显性-阴性形式抑制−994/−960区域的启动子活性。将含有多聚化−994/−960序列的指示的萤光素酶构建体与显性阴性形式的LHX3、KRAB-LHX3或等量的空pcDNA3载体(对照)共转染到αT3-1细胞中。结果为平均值±标准偏差至少进行三次独立实验,一式三份。C、 增加GATA2剂量逐渐降低LHX3/ISL1诱导的刺激。在CHO细胞中以固定浓度的LHX3和ISL1表达载体(每孔10 ng)和增加GATA2表达载体浓度(每孔2.5到20 ng)共同转染含有在三个TAAT基序(D-LIREmut 4X)上突变的四个D-LIRE(D-LIRE 4X)或D-LIRE拷贝的荧光素酶构建物。如图所示,通过添加pcDNA3使含有载体的巨细胞病毒启动子的总浓度(40 ng/孔)保持恒定。结果为平均值±标准偏差一式三份的三个独立实验。***,P(P)< 0.001; **,P(P)< 0.01; 纳秒,P(P)>0.05之间。