美国国家科学院院刊。1990年4月；87(7): 2725–2729.
细胞因子信使核糖核酸和脱氧核糖核酸的分析：竞争聚合酶链式反应的检测和定量。
马萨诸塞州波士顿哈佛医学院百翰女子医院医学部霍华德·休斯医学研究所实验室，邮编02115。
摘要
研究了佛波醇12-肉豆蔻酸13-醋酸盐诱导前后MLA-144细胞中粒细胞吞噬集落刺激因子（GM-CSF）和白细胞介素3（IL-3）两种细胞因子的表达。我们描述了聚合酶链反应（PCR）的一种适应性，用于对少量细胞的mRNA或DNA进行高度准确的定量。将含有待测RNA cDNA拷贝的PCR混合物等分样品添加到竞争DNA片段的系列稀释液中，该竞争DNA片段通过具有小内含子或突变的内部限制酶位点而与感兴趣的cDNA不同。因此，使用相同的引物来共同扩增未知和竞争对手。通过放大，产物的比率保持不变，并且可以很容易地进行量化。在未刺激的细胞中，未检测到GM-CSF或IL-3 mRNA。然而，在适当的诱导下，仅在200个细胞中检测和定量了这两种细胞因子的mRNA。竞争性PCR还用于准确定量正常人类细胞、5q综合征患者克隆细胞群和已知只有一个人类GM-CSF基因拷贝的人仓鼠细胞系中人类GM-CSF基因的拷贝数。
全文
全文可用作原始打印版本的扫描副本。获取完整文章（1.2M），或单击下面的页面图像逐页浏览。PubMed链接也可用于选定的引用.
选定的引用
这些参考文献在PubMed中。这可能不是本文的完整参考文献列表。
- Chelly J、Kaplan JC、Maire P、Gautron S、Kahn A.人类肌肉和非肌肉组织中肌营养不良蛋白基因的转录。自然。1988年6月30日；333(6176):858–860.[公共医学][谷歌学者]
- Chelly J、Concordet JP、Kaplan JC、Kahn A.非法转录：任何细胞类型中任何基因的转录。美国国家科学院院刊。1989年4月；86(8):2617–2621. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
- Sarkar G，Sommer党卫军。信使RNA序列或其蛋白产物的获取不受组织或物种特异性的限制。科学。1989年4月21日；244(4902):331–334.[公共医学][谷歌学者]
- Frye RA，Benz CC，Liu E.通过差异聚合酶链式反应检测扩增的致癌基因。致癌物。1989年9月；4(9):1153–1157.[公共医学][谷歌学者]
- Arrigo SJ，Weitsman S，Rosenblatt JD，Chen IS.用定量聚合酶链式反应方法分析rev基因对人类免疫缺陷病毒1型在淋巴细胞中复制的作用。《维罗尔杂志》。1989年11月；63(11):4875–4881. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
- Niemeyer CM、Sieff CA、Mathey-Prevot B、Wimperis JZ、Bierer BE、Clark SC、Nathan DG。人类白细胞介素-3（multi-CSF）的表达仅限于人类淋巴细胞和T细胞肿瘤细胞系。鲜血。1989年3月；73(4):945–951.[公共医学][谷歌学者]
- Higuchi R，Krummel B，Saiki RK。DNA片段体外制备和特异性突变的一般方法：蛋白质和DNA相互作用的研究。核酸研究。1988年8月11日；16(15):7351–7367. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
- Chirgwin JM、Przybyla AE、MacDonald RJ、Rutter WJ。从富含核糖核酸酶的来源中分离生物活性核糖核酸。生物化学。1979年11月27日；18(24):5294–5299.[公共医学][谷歌学者]
- Nienhuis AW、Bunn HF、Turner PH、Gopal TV、Nash WG、O'Brien SJ、Sherr CJ。人c-fms原癌基因在造血细胞中的表达及其在5q综合征中的缺失。单元格。1985年9月；42(2):421–428.[公共医学][谷歌学者]
- Shaw G，Kamen R.来自GM-CSF mRNA 3'非翻译区的保守AU序列介导选择性mRNA降解。单元格。1986年8月29日；46(5):659–667.[公共医学][谷歌学者]
- Nimer SD、Morita EA、Martis MJ、Wachsman W、Gasson JC。通过遗传分析表征人类粒细胞巨噬细胞集落刺激因子启动子区域：与DNase I足迹的相关性。分子细胞生物学。1988年5月；8(5):1979–1984. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
- Shannon MF，Gamble JR，Vadas MA。与人类粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子基因启动子区相互作用的核蛋白。美国国家科学院院刊。1988年2月；85(3):674–678. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
文章来自美国国家科学院院刊由以下人员提供美国国家科学院
