扩展数据图2

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海马脑片单棘结构可塑性过程中Rac1传感器的特性

a。(左)Rac1、RhoA、Cdc42和TrkB的信号传播比较,这些信号在刺激开始后1–2分钟归一化为脊柱活动。误差条表示s.e.m.数据对应于图1(正文)。(右)四个传感器扩散指数的比较(扩散指数=刺激后1-2分钟树突(1-5μm)中的活性/最大脊柱激活)。通过引导估计错误。星号表示通过独立样本t检验得出的统计显著差异(p<0.05)。

b。与(a)相同,但用于刺激后15-20分钟。

c。使用光活化GFP(paGFP)分析组成活性(Q61L)和野生型Rac1的扩散时间常数。(左)paGFP-Rac1的代表性2p图片第61季度在光活化后的单个树突棘中。虽然激活的Rac1显示出稍微较慢的扩散,但Rac1(wt)(中间)和Rac1Q61L问题和Rac1(wt)以近似相等的扩散时间常数从脊椎扩散开(右两个图;wt:n=41个脊椎/4个细胞;Rac1Q61L问题:67个脊椎/7个细胞)。

d。sLTP期间Rac1信号的药理学特征。在存在NMDA受体阻滞剂APV(APV;100μM;n=6个细胞/13个棘)和存在细胞渗透性CaMKII抑制肽tatCN21(CN21;10μM;n=5个细胞/11个棘)的情况下,在2p-谷氨酸去壳期间,在对照条件下Rac1激活(ctrl;n=102个细胞/121个棘)。误差条代表标准误差。

e、。实验用脊柱体积变化的时间过程(d) ●●●●。误差条代表标准误差。

f、。AP5和CN21对sLTP期间Rac1激活的瞬态(刺激后1–2分钟;CtrlΔBF=0.049±0.003;+AP5ΔBF=0.00±0.01;+CN21ΔBF=0.01±0.01)和持续(刺激后10分钟以上;Ctrl△BF=0.033±0.002;+AP6ΔBF=0.006±0.007;+CN21-ΔBF:0.026±0.05)阶段的影响总结。误差条代表s.e.m.星号表示通过独立样本t检验确定的统计显著差异(p<0.05)。

g、。Rac1传感器激活的接近生理温度的影响。用一个装有ACSF容器的加热块加热灌注液,并在灌注室后部测量温度。(RT=室温,n=102个细胞/121个棘;对于30–32°C,n=11个细胞/13个棘)。误差条代表标准误差。

小时。Rac1传感器过度表达神经元附近脊柱中sLTP诱导后,未刺激脊柱体积变化的可变性。显示的数据是靠近sLTP诱导部位的未刺激脊髓的时间进程。虽然在这种刺激下,附近脊柱体积没有平均变化(图1c,正文),偶尔会出现放大或缩小。数据对应于从777个附近脊椎中随机选择的100个脊椎,这些脊椎的测量值为图1c.

i、。附近脊椎体积随距离受刺激脊椎距离的变化而发生短暂(1-2分钟)变化。数据对应于为测量Rac1空间分布的实验测量的所有邻近脊椎(n=56个细胞/79个实验/218个邻近脊椎;图1e,正文)。插入方程对应于最佳拟合的线性模型。

j。与(i)相同,但适用于附近脊椎体积的持续变化(10-20分钟)。