图5

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EpRas细胞中表达的TD-IκBα可预防EMT,而CA–IKK-2在缺乏TGF-β的情况下可诱导EMT(胶原凝胶分析)。将表达空载体对照、TD-IκBα或CA–IKK-2的EpRas细胞接种到胶原凝胶中,允许其形成结构3-5天,不进行诱导处理(-),或通过添加TGF-β(+)诱导其进行EMT 5-6天。(一个)左柱,无TGF-β培养7天;中柱,无TGF-β培养5天,加上TGF-α处理(5 ng/ml)1天;右柱,无TGF-β培养5天,加上TGF-?治疗(5 ng/ml)5天。图中显示了具有管腔(黄色箭头)或扩张弦的代表性管状结构以及具有间充质形态的侵袭性细胞束(白色箭头)的照片。原始放大倍数,×100。(B类)间充质结构的量化(参见中的白色箭头一个对于CA–IKK-2,–TGF-β培养),在没有TGF-。下图,n个表示所分析的胶原蛋白凝胶的数量。条形图表示分析单个胶原蛋白凝胶时获得的标准偏差。(C类)对胶原凝胶结构进行染色,以检测上皮标记物E-cadherin(第一和第二列)或间充质标记物vimentin(第三和第四列)。最下面一行,左起第二行(CA–IKK-2–表达细胞,–TGF-β):E-cadherin染色结构的GFP表达(绿色)。插图,左起的第三个面板,中间一行(TD-IκBα-表达细胞,+TGF-?):E-钙粘蛋白染色的分解结构。插图,右起的第二个面板,最下面一排:波形蛋白染色结构的GFP表达(绿色)。原始放大倍数,×400。