图1

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肿瘤介导的葡萄糖限制改变T细胞代谢并抑制其产生细胞因子的能力

(A类) 1×106将d42m1衍生的R或P肿瘤细胞皮下注射到129S6小鼠(n=5)中。肿瘤大小显示为两个独立实验的10只小鼠的两个垂直直径±SEM的平均值。(B类)C3 T细胞单独培养,或与1:5 P或R细胞一起培养24小时,然后PMA/离子霉素刺激±20mM额外葡萄糖(Glc)5小时,并通过FACS测量IFN-γ。%IFN-γ+T细胞(右上)和平均荧光强度(MFI)(垂直);代表≥2个独立实验。(C类)培养物中的葡萄糖浓度(B类)刺激前;表示≥2个独立实验,以平均值±SEM表示**第页=0.0087, ***第页=0.0011. (D类)ECAR和R或P肿瘤增殖。在第0天和第3天测量CellTrace Violet(CTV)标记细胞的增殖情况,这代表了≥3个独立实验***第页=0.001. (E类)将R或P肿瘤皮下注射到129S6小鼠体内,并于第12天分离TIL。(F类)通过FACS在TIL中表达CD44、CD62L、PD-1、T-bet、磷酸化4E-BP1(p4E-BPl)和S6K(pS6K),代表了≥3个独立实验。()ECAR和OCR/ECAR体外肿瘤细胞和TIL。光学字符识别(O2消耗率)是OXPHOS的指标。数据显示为来自3个独立实验的平均值±SEM**第页=0.003, ***第页=0.001. (H(H))TIL的最大糖酵解能力。条形图显示为平均值±SEM,代表2个独立实验。()在PMA/离子霉素刺激5h后测量TIL中IFN-γ的产生。IFN-γ产生细胞的轮廓图(上图)和MFI(下图)。代表≥3个独立实验。(J型)肿瘤细胞外环境中的葡萄糖浓度***第页=0.0005. 5只小鼠的平均数据。(K(K))将2-NBDG静脉注射到荷瘤小鼠体内,15分钟后收获肿瘤。直方图(上图)描述了TIL 2-NBDG的摄取。条形图(如下)显示了3只小鼠的平均MFI±SEM**第页=0.0147. 另请参见图S1.