图6

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DNAJB2a通过将TDP-43引入HSP70介导TDP-43的重折叠。(A类)DNAJB2a的域结构,显示J(和H31)、客户端绑定(CBD)和UIM域的位置。(B类)共表达GFP-野生型TDP-43和myc-DNAJB2a的HEK293T细胞构建48小时后分馏。GFP抗体显示不溶性TDP-43的水平,磷酸化TDP-43通过磷酸化TDP-43特异性抗体检测。(C类)用泛素蛋白酶体系统抑制剂MG-132(0.5μM,40 h)处理共表达GFP-WT-TDP-43和仅载体(vec)、HSF1(+)或myc-DNAJB2a的细胞,然后进行分馏。()GFP-TDP-43和myc-DNAJB2a的联合免疫普及。Myc-DNAJB2a被Myc抗体拉下,GFP-TDP-43被TDP-43抗体检测到。(电子)GFP-TDP-43和V5-HSFP70的共离子纯化。V5-HSP70和V5-HSP 90被V5抗体拉下,GFP-TDP-43被GFP抗体检测。