BECN1-结合缺陷型TRS1突变病毒不抑制自噬。(A) HA标记的TRS1重组病毒的示意图。(B) 通过免疫印迹法检测TRS1和IRS1的表达,用所示病毒感染后的细胞裂解物中的抗TRS1抗体和IRS1抗体进行检测。(C) 用TRS1(45–795)-ΔIRS1和TRS1HA-ΔIR S1重组病毒感染MRC5细胞48小时。用山羊抗BECN1抗体免疫沉淀细胞,然后用抗HA抗体和抗BECN 1免疫印迹。(D) MRC5细胞被指示的病毒感染,转染GFP-LC3,然后固定24h。通过计算每个细胞中GFP-LC3点的数量来量化IEA阳性细胞中的自噬。结果是3个独立实验的平均值。每次分析计数20个细胞。***,P(P)<0.001(单向方差分析)。(E) 在MOI 1感染指示病毒的MRC5细胞中SQSTM1和LC3水平的免疫印迹分析。ACTB被用作加载控制。CQ,氯喹。