图5

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化合物968通过阻断HCC827ER细胞GAC活性逆转获得性埃洛替尼耐药

(A类)HCC827细胞在添加10%FBS的RPMI 1640中培养,并用0、1、5和10μM浓度的化合物968处理48小时(左面板)或用10μM化合物968治疗0、12、24和48小时(右面板)。Western blot检测EGFR和GAC的表达。(B类)HCC827ER细胞在添加10%FBS的RPMI 1640中培养,并用0、1、5和10μM浓度的化合物968处理48小时(左面板)或用10μM化合物968治疗0、12、24和48小时(右面板)。Western blot检测EGFR和GAC的表达。(C类)HCC827(左图)和HCC827ER(右图)细胞在补充10%FBS的RPMI 1640中培养,并分别用化合物968(10μM)、或埃洛替尼(1μM)或化合物968(10μM)与埃洛替尼(1μM)联合处理48小时。Western blot检测EGFR和GAC的表达。(D类)HCC827和HCC827ER细胞在添加10%FBS的RPMI 1640中培养,分别用化合物968(10μM)、埃洛替尼(1μM)或化合物968与埃洛替尼联用48小时,然后从不同细胞中分离线粒体,用谷氨酰胺酶活性测定法测定GAC活性。数据代表三个独立实验的平均值(平均值±标准差)**P(P)< 0.01, ***P(P)< 0.001.