图S3。

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MEKK2调节β-catenin的活性和稳定性。(一个)用不同数量的MEKK2(KD)或MEKK1(WT)以及TOPflash-luciferase和雷尼利亚.转染48小时后测量荧光素酶活性,并将其归一化为雷尼利亚. (B类,上部)显示MEKK2截短突变体的图表。(下部)将MEKK2与TOPflash-luciferase和雷尼利亚.CT,C端子;FL,全长;NT,N端子。(C类)1周龄胫骨β-catenin的免疫组织化学研究Mekk2公司+/+Mekk2型−/−老鼠。(放大倍数:40×。)(D类电子)主要COB从Mekk2公司+/+Mekk2公司−/−将幼崽和幼崽在成骨细胞分化条件下培养7d(D类)通过RT-PCR分析β-catenin的表达。(电子)用10μM MG132处理细胞8 h,并用抗β-连环蛋白抗体进行免疫印迹。(F类)将载体(vec)或HA-MEKK2与Flag–β-catenin一起转染HEK293细胞,并用脉冲相标记法测定β-catentin的稳定性[35S] 蛋氨酸随后进行放射自显影和ImageJ分析。()质谱数据证明丝氨酸675是β-连环蛋白中MEKK2-介导磷酸化的位点。