图1

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ErbB2激活在mRNA和蛋白质水平上调GLS1的表达。A: 对从MCF10A-NeuT及其亲本细胞系MCF10A制备的总细胞裂解物进行Western blotting分析。同时检测ErbB2和GLS1,并使用α-微管蛋白作为负荷对照。B: 实时PCR定量分析GLS mRNA水平。从MCF10A和MCF10A-NeuT细胞中分离出总RNA样本,并反转录到cDNA。通过qRT-PCR(ΔRQ)测定GLS1和GLS2在mRNA水平的表达。所示误差条为标准偏差*P(P)< 0.05. C: ErbB2敲除降低MCF10A-NeuT细胞中GLS1的水平。对照组和ErbB2特异性siRNA转染MCF10A-NeuT细胞。制备转染后20小时的细胞裂解物,并用Western blots进行分析。D: EGF处理后GLS1表达。用指定剂量的EGF处理MCF10A。处理后6小时收集细胞。Western blot检测GLS1,pErk作为ErbB2信号通路激活的指标。