mTORC1信号是细胞外蛋白依赖性生长的负调控因子（A）K-Ras的细胞数G12D系列在含有亮氨酸或不含亮氨酸的培养基+3%白蛋白和以下抑制剂中培养第3天的MEFs：MEK1/2（1μM PD0325901，50μM PD98059）、PI3激酶（25μM LY294002，2μM wortmannin）、酪氨酸激酶（50μM染料木素）、mTOR（50 nM雷帕霉素，250 nM鸟嘌呤1）、mTOR/PI3激酶（0.5μM BEZ235，0.5μM GDC0980）。虚线表示起始单元格编号。（B）K-Ras中mTOR、PI3-激酶和MAP激酶途径的活性G12D系列MEF在无亮氨酸培养基+3%白蛋白中培养1天，WB分析。抑制剂如（A）所示（C）K-Ras生长曲线G12D系列无亮氨酸培养基中的MEF为±3%白蛋白，显示了torin 1的浓度。（D）K-Ras生长曲线G12D系列在无亮氨酸培养基±3%白蛋白中表达针对猛禽、立克次体或对照的shRNA的MEF。（E）K-Ras的亮场图像G12D系列在无亮氨酸培养基±3%白蛋白中培养第4天，MEF表达针对猛禽、立克次体或对照的shRNA。比例尺=50μm。
数据表示为平均值±STDEV（n=3）。另请参见图S5.
