图2

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SLC38A9与Rag-Raulator复合体有关。(A) 通过IP-MS分析14种毒饵(包括猛禽、TSC、LAMTOR1-5和Rag GTPases以及SLC38A9)获得的调节性mTORC1相互作用网络概述。功能组和分析缓冲区的编码如图例所述图1SLC38A9 HCIP用黑色镶边标记。与全长SLC38A9或其N末端片段(aa 1至119)的相互作用分别以黑色和灰色表示。提供了SLC38A9的域结构示意图。完整的蛋白质组数据见补充材料中的表S1A和B以及图S1。(B) 293T-REx细胞诱导表达Rag-Ragulator复合物或TSC2的HA标记成分,用GFP-SLC38A9转染或保留未转染(模拟)。NP-40细胞裂解物用所示的抗GFP或抗HA珠进行免疫沉淀,并通过SDS-PAGE和免疫印迹分析。*,IgG重链。(C和D)293T细胞用HEPES缓冲液溶解,然后用抗SLC38A9、抗RRAGC或抗myc作为对照进行免疫沉淀。共免疫沉淀蛋白通过SDS-PAGE分离并通过免疫印迹(C)分析,或进行凝胶内胰蛋白酶消化和质谱分析(D)。肽的数量显示为每种蛋白质0到15个肽。免疫沉淀诱饵蛋白用红边标记。完整的蛋白质组数据见补充材料中的表S1C。