图5

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拉布18敲除抑制脂滴丢失和α-平滑肌肌动蛋白的诱导

在培养激活的第2天,用拉布18siRNA或加扰控制。(A)24小时后全细胞裂解物的基因和蛋白质表达拉布18击倒。(B)免疫荧光显微镜显示中性LDs的保留(BODIPY,绿色)。细胞核为蓝色(DAPI),放大63倍。右侧显示了使用密度测定法定量脂滴表面积(代表36个细胞)。(C) 第3层后基因和蛋白质表达拉布18击倒。(D)α-平滑肌肌动蛋白(抗肌动蛋白,绿色;细胞核,蓝色(DAPI);放大10倍)和基因表达拉布18击倒。(E)基因表达Acta2、Crbp1和Plin3天然Rab18、GTPase(S22N–“关闭”;C67L–“开启”)或异戊二烯化(C203A)突变体过度表达后。(F)当Rab18 GTPase活性被淬灭(S22N)或Rab18膜插入被取消(C203A)时,在原代细胞培养的第5天,油红O染色法显示野生型星状细胞中的脂质潴留.右侧显示了通过总像素计数进行的量化。N=3-5只小鼠/基因型。所有数据均为平均值±SEM,通过单因素方差分析和事后检验进行分析:*,P<0.05;**,P<.01;***,P<0.001;NS,P>.05。