图4

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GLS抑制使GBM细胞对mTOR靶向治疗敏感。

(A类)用2种GLS siRNA和干扰对照siRNA构建物转染U87和U87/EGFRvIII细胞24小时,并换成10%FBS培养基2天。细胞数表示3个独立实验的平均值±SEM。(B类)谷氨酰胺相对摄取量和NH4+对照GLS敲除U87和U87/EGFRvIII细胞的产量。数据表示3个独立实验的平均值±SEM*P(P)<0.05,根据双尾学生t吨测试。(C类)使用U87/EGFRvIII细胞的指示抗体进行免疫印迹分析,该抗体带有针对GLS的siRNA结构,或使用PP242或对照DMSO处理2天的对照LacZ。GLS、p-AKT(Ser473)和AKT的图像是使用相同的细胞裂解液从另一个凝胶中获得的。(D类)TUNEL染色的U87/EGFRvIII GBM细胞的代表性图像。用抗GLS的siRNA转染细胞,并用1μM PP242或DMSO处理对照LacZ 2天。用ImageJ软件对TUNEL阳性细胞进行定量。数据表示每组3个独立图像的平均值±SEM**P(P)<0.01,根据双尾学生t吨测试。比例尺:100μm。(电子)用1μM PP242和/或1μM化合物968处理2天的U87/EGFRvIII和SVGP12细胞的TUNEL染色。用ImageJ软件对TUNEL阳性细胞进行定量。数据表示每组3个独立图像的平均值±SEM。Tukey-Kramer诚实显著性检验用于多重比较检验***P(P)< 0.001. 另请参见补充图6–9.