图4

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GDH1部分通过调节癌细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活性来促进氧化还原稳态

(A)GDH1敲除对MDA-MB231中GPx和其他ROS清除酶(包括GSR、TRX、SOD、CAT和PRX)活性的影响(左边)和H1299(正确的)单元格。Western blot显示GDH1稳定敲除或空载体细胞中GPx1、GSR、TRX1、SOD2、CAT、PRX3和GDH1的表达。β-actin作为负荷对照。(B)GPx1敲除对总GPx活性的影响(左边),细胞增殖(中间的)和ROS(右侧)在MDA-MB231癌细胞中。通过Western blotting测定GPx1的敲除效率。通过细胞计数和羧基-H评估细胞增殖率和活性氧水平2DCFDA检测。(C)在用GPx1表达结构转导的293T细胞中诱导GPx1的表达,该表达结构包含一个3'UTR和一个对亚硒酸盐反应的SECIS元件。使用抗myc和抗GPx1抗体通过免疫印迹法测定myc标记的GPx1的表达。(D)myc-GPx1稳定表达对细胞总GPx活性的影响(左边),细胞增殖(中间的)和ROS(正确的)在MDA-MB231和H1299细胞中稳定敲除GDH1。在所有试验的培养基中添加10 ng/ml亚硒酸盐。Western blot分析显示GDH1敲除和myc-GPx1表达。数据为三个重复的平均值±SD。p值由双尾Student’s确定t吨测试(*0.01<p<0.05;**0.001<p<0.01)。另请参见图S3.