图6

(A类)¹³C原子分解嘧啶生物合成¹³C类₆-葡萄糖和¹³C类₅-谷氨酰胺用一个¹³C类₅-通过磷酸戊糖途径（PPP）产生的核糖部分（红点）和¹³C类_1-3尿嘧啶环（蓝点）来源于¹³C类_2-4-通过克雷布斯循环或ME和PC的联合作用产生的天冬氨酸（蓝色圆点）。用shPC55或shEV转导的A549细胞与¹³C类₆-葡萄糖或¹³C类₅-谷氨酰胺24小时。从极性细胞提取物的FT-ICR-MS分析中分批富集UTP和CTP同位素表明¹³C类₆-葡萄糖衍生¹³C类₅-核糖（5同位素）和¹³C类₆-葡萄糖–或¹³C类₅-谷氨酰胺衍生¹³C类_1-3-嘧啶环（“6–8”或“1–3”同位素，用绿色虚线矩形突出显示；对于“6-8”同位素，5¹³Cs来源于核糖和1-3¹³C来自环）（10，45）。这些数据表明，PC敲除抑制葡萄糖和谷氨酰胺从头合成嘧啶。(B类)葡萄糖和谷氨酰胺碳通过柠檬酸盐进入脂肪酸。对非极性细胞提取物标记脂质的FT-ICR-MS分析表明，PC敲除严重抑制了葡萄糖和谷氨酰胺碳并入磷脂酰胆碱脂质的脂肪酰链（偶数）和脂肪酰链加甘油主链（奇数>3）。然而，合成¹³C类_三-甘油骨架（“3”同位素）或其前体¹³C类_三-α-甘油-3-磷酸（αG3P，m+3）来自¹³C类₆-PC基因敲除增强而非抑制葡萄糖。这些数据表明PC抑制特异性地阻碍A549细胞中的脂肪酸合成。值表示三倍的平均值(n个=3），标准误差*P（P）< 0.05, **P（P）<0.01，以及***P（P）<0.001（学生）t吨检验，假设方差不相等。