图4

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通过shRNA抑制PC抑制体外和体内人类NSCLC细胞系的增殖和致瘤性。

在用嘌呤霉素转导和选择后1周开始增殖和集落形成测定。转导后8天在NSG小鼠中进行A549异种移植*P(P)< 0.01, **P(P)< 0.001, ***P(P)<0.0001,以及****P(P)<0.00001(学生)t吨检验,假设方差不相等。误差条代表SEM()用shPC55或shEV转导NSCLC细胞系。增殖试验(n个=6)在相对较长的潜伏期后,所有5个细胞系中的PC敲除均显示出显著的生长抑制。(B类)集落形成分析表明,PC敲除降低了A549和PC9细胞在软琼脂中形成集落的能力(n个= 3). (C类)shPC55转导A549细胞的肿瘤异种移植的生长速度比对照shEV肿瘤慢2倍(P(P)<0.001由未配对的韦尔奇版本t吨测试)。肿瘤大小计算为πab/4,其中a和b是x,y直径。每个点代表平均6只小鼠。实线是非线性回归拟合方程:尺寸=a+bt吨2,如方法中所述。(D类)小鼠异种移植中PC基因敲除的程度(n个=6)比细胞培养中的小,导致PC表达减弱(对照组的30%–60%)和生长抑制减少。此外,根据皮尔逊相关系数,切除肿瘤中PC的表达与个体生长率相关。