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图2。

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实时荧光分析检测GAC四聚体的形成。(A类)FRET分析的示意图。(B类)25 nM 488-GAC(供体)荧光在以剂量依赖的方式添加QSY9-GAC(受体)后熄灭,并通过添加10倍多余的未标记GAC而反转。(C类)FRET由25 nM 488-GAC滴定而得,QSY9-GAC(○)的量增加,GAC(●)的体外活化浓度依赖。FRET数据符合二次结合等温线。点表示三个独立实验的平均值±SD。(D类)将越来越多的BPTES添加到25 nM 488-GAC和25 nM QSY9-GAC中,以检查抑制剂对GAC四聚体形成的影响。添加10倍多余的未标记GAC,试图逆转四聚体的形成。(E类)968诱导488-GAC荧光的剂量依赖性猝灭,这与添加QSY9-GAC诱导的猝灭不同。(F类)在没有QSY9-GAC的情况下,添加不同浓度的968至10 nM 488-GAC时的荧光猝灭。

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