图7

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K荧光增强+-LEs中的敏感染料APG3。(A) 用APG3装载内体。A549细胞在EGF-AF647(200 ng/ml)在冰上结合30分钟之前,血清饥饿4小时。然后用生长培养基清洗细胞,并在37°C下用APG3加载30分钟(APG3脉冲)。活细胞用共焦显微镜成像。EGF-AF647信号被假彩色为红色,以便更好地显示产生的黄色共定位信号。(B) 随时间内化后APG3荧光。如图A图例所述,用APG3加载细胞。用染料孵育30分钟后,洗涤细胞,转移到显微镜下,并在指定的时间点成像。在诺卡唑治疗的情况下,细胞在药物和APG3存在下孵育30分钟,然后与新鲜的诺卡唑培养基交换成像时间。(上图)APG3脉冲后60分钟两种情况的代表性图像;使用基于ImageJ的定量测定APG3加载后指定时间点的(底部)平均荧光强度。(A,B)细胞边界和细胞核在传输模式下确定,并在图像中以虚线表示。棒材,20μm。