高K的影响+IAV堆芯启动期间的浓度。（A） 在酸-旁路感染之前，在各种单价阳离子条件下进行预酸化。将X31在37°C的缓冲液中预处理1 h，缓冲液的pH值调整为7.4或5.8，并补充120 mM指示的单价阳离子。总离子强度保持不变。结合后，采用文中所述的正常酸-旁路方案。（B） K预孵育+浓度范围（0至135 mM K+)酸碱性感染前pH值为5.8。（C） 预处理病毒与A549细胞的结合。在所示条件下，将X31在37°C下预处理1 h，中和，并在冰上与A549细胞结合1 h。细胞被固定、清洗并保持不渗透状态。使用抗X31多克隆抗体（Pinda）检测结合颗粒。（D） 暴露于高（120 mM）和低（5 mM）K的酸性条件下，HA酸化+浓度在37°C下保持1小时。（E） 在120 mM K存在下预酸化（pH 5.8）后R18-标记X31与A549细胞表面融合动力学的荧光光谱监测+按照图例中的说明测量R18去淬.（F）在120 mM K存在下预酸化后IAV脱涂层+并在PM处进行酸诱导融合。病毒在37°C下预处理1h。中和后的病毒与冰上的A549细胞结合，并按照酸-旁路感染试验所述诱导融合。融合后，在含有CHX的终止培养基中培养细胞5分钟（M1）和30分钟（NP），固定细胞，并通过间接免疫荧光分别对M1和NP进行染色。（左）代表性图像。DRAQ5染色显示细胞核。（右）M1和NP暴露，作为病毒脱膜的一项措施，按照图例中的描述进行量化.棒材，20μm。（G） 存在和不存在K时X31的预酸化（预酸）+-120 mM和5 mM K下的特异性离子载体缬霉素+在酸-旁路感染之前。（H） 在CCCP、缬氨霉素和金刚烷胺存在下对WSN（AS）进行酸旁路感染检测。（右）如图所示，IAV在RT时用指示的药物组合预处理5分钟。当金刚烷胺与CCCP、缬氨霉素或两者结合时，病毒首先用金刚烷碱处理5分钟以阻断M2通道，然后用CCCP、valinomycin、，或者将两者都添加到溶液中，并将混合物进一步培养5分钟。在融合步骤中存在药物。在与X31相同的条件下进行酸-旁路感染试验。
