图3

（A） 在第0天和第9天，使用异基因sBc刺激FACS纯化的Tregs。在六个独立实验中，显示了Treg在14天培养中的折叠扩展。箭头指示重新模拟的时间。（B） 用CD40L-sBc刺激Tregs 9天，然后分离培养物，其中一半用同一供体的CD40L-s Bc重新刺激，另一半用抗CD3和抗CD28涂层珠重新刺激。显示了三种独立配对培养物在第14天的折叠扩展(第页=0.75，Wilcoxon配对签名秩检验）。（C） 扩增Tregs的同种异体反应性是通过在用相同的用于扩增的CD40L-sBc（粗线）、抗CD3和抗CD28涂层珠（细线）或同基因CD40L-s Bc（阴影直方图）重新刺激前用CFSE标记扩增Treg来确定的。（D和E）显示了初次刺激后第9天（D）和第11天（E）的Treg培养物的外观。数据表示来自至少10种独立文化的结果。（F） 用CD40L-sBc刺激Tregs 9或11天，然后用抗CD3和抗CD28涂层珠重新刺激。在重新刺激5天后收获培养物，并比较三对培养物的总折叠扩张(第页=0.25，Wilcoxon配对有符号秩检验）。（G） 用CD40L-sBc刺激Tregs 11天，然后用Invitrogen（开放符号）或Miltenyi Biotec（封闭符号）的抗CD3和抗CD28涂层珠重新刺激。显示了三种配对培养物中细胞随时间的膨胀。采用Wilcoxon配对符号秩检验比较第16天总折叠扩张的差异(第页= 0.25). （H） XY散点图显示了arTreg扩增与不同CD40L-sBc制剂上表达的HLA-DR、CD80和CD86的平均荧光强度（MFI）的相关性。这些数据是11种独立arTreg培养基的摘要。arTregs、arTreg、同种抗原反应Tregs；CD40L-sBc、CD40L-刺激的B细胞；羧基荧光素琥珀酰酯；荧光活化细胞分选；Tregs，调节性T细胞。