图5

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在神经形成过程中,Dvl2-EGFP主要定位于神经上皮膜

神经形成胚胎神经上皮的激光扫描共聚焦显微镜的单光学切片显示,在野生型背景下,Dvl2-EGFP主要定位于神经上皮(A、E、I)的质膜。在用抗EGFP抗体染色的野生型和Lp/Lp突变的两体期胚胎中观察到一致的结果(A类,B类)或通过直接可视化来自短暂固定的五体节期胚胎的Dvl2-GFP信号(E类,F类)或培养活的八成熟期胚胎(,J型). Dvl2-EGFP和肌动蛋白在A、B细胞中的胞质分布明显弥散,这是由于共焦激光显微镜扫描了位于顶端质膜正下方的焦平面所致。来自二体期和五体期的野生型和突变胚胎也用磷脂酶染色(C类,D类,G公司,H(H))标记F-actin。当整个系列z(z)对堆叠进行了检查(数据未显示),很明显,Dvl和肌动蛋白都定位在外侧质膜上,因为单个光学切片更基本地扫描细胞。奇怪的是,在五体细胞期(E-H),Dvl2-EGFP和肌动蛋白在体细胞中胚层的分布也更为分散。Dvl2-EGFP在神经上皮中的总体分布在磅/磅突变体(B、D、F、H、J、L;数据未显示)。(K、 L(左))培养物中活的野生型(K)或Lp/Lp突变体(L)胚胎的DIC图像。NE,神经上皮;SM,体细胞中胚层。