图2

G510S突变对PKC稳定性和功能的影响δ.A、，蛋白印迹显示G510S PKC中T507、S645和S662位点磷酸化较弱δ–转染和野生型PKCδ–转染的H157和HEK 293T细胞。PKC的磷酸化δG510S没有增加底物MARCKS和Mark2。B、，Western blot显示在表达G510S-PKC的细胞中未诱导Mark2磷酸化δ佛波酯醋酸酯（PMA）刺激后5分钟。C、，野生型PKC的表达δ和G510S PKCδ转染后构建。野生型PKCδ转染后表达持续96小时，而G510S突变体在96小时时未被检测到，在72小时时表达水平显著降低。D、，G510S突变对PRKCD公司mRNA完整性。逆转录-聚合酶链反应检测PRKCD公司和GAPDH公司从受影响同胞V-4和V-1、其父代（IV-2）、未受影响同胞（V-2）和HEK 293T细胞建立的淋巴母细胞系（LCL）中提取的RNA。E类和F、，从家族成员中采集的LCL裂解物的Western blot分析表明，G510S突变患者表达的PKC水平较低δ并减少T507、S645和S662位点的磷酸化。G、，PMA刺激受试者V-2和V-3 LCL的效果。刺激不会诱发PKCδ纯合患者V-3的激活。请参见图1其他定义。