对DSB的响应需要功能MRN，Mre11–ATLD将基本和非基本Mre11功能分开（A） 对DSB反应的蛋白激酶活性非洲爪蟾鸡蛋提取物通过加入32P来自γ-32在存在（加DSB）或不存在（减DSB）片段DNA的情况下，将P-ATP转化为H2AX衍生肽。标签：野生型，含有丝氨酸134和丝氨酸139的H2AX底物肽；S134A，H2AX底物肽，丝氨酸134替换为丙氨酸；S139A，H2AX底物肽，丝氨酸139替换为丙氨酸；S134A/S139A，将两种丝氨酸替换为丙氨酸的H2AX底物肽。
（B） 与线性DNA以50 ng/μl（相当于4.5×10）孵育的提取物10用H2AX肽在缓冲液（对照）、ATM中和抗体（ATM Ab）、ATR中和抗体（ATR Ab），ATM和ATR中性抗体（ATM/ATR Abs），Ku70耗尽提取物（ATM/ATR Abs；Ku耗尽）中的ATM和ATMR中和抗体，5 mM咖啡因（咖啡因）存在下测定breaks/μl）。
（C） 在0、5、10、25和50 ng/μl线性DNA存在的情况下，在对照提取物（填充钻石）、模拟缺失提取物（开放钻石）、Mre11-缺失提取物（开口方块）、添加500 nM重组MRN（填充方块）、，或补充500 nM MRN-ATLD1/2（填充三角形）的Mre11-缺失提取物。
（D） 用TUNEL法监测DNA复制过程中DSB的积累。从对照提取物（条纹）、Mre11缺失提取物（圆点）、补充MRN（钻石）的Mre11耗尽提取物、补充MRN-ATLD1/2（灰色）或模拟缺失提取物（白色）中分离复制后细胞核。
