图6

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肝癌细胞和原发性肝癌中GLS2启动子的超甲基化

(A) CpG站点位于GLS2级启动子区域。CpG位点及其基因组位置GLS2级启动子区域由垂直线表示。核苷酸位置相对于转录起始位点(TSS;+1)进行编号。标记甲基化特异性PCR(MSP)和亚硫酸氢盐基因组测序(BGS)分析的引物位置。(B) 超甲基化GLS2级MSP分析检测HCC细胞中的启动子。甲基化状态GLS2级用MSP分析4个肝癌细胞株和3个非肿瘤肝组织(由Origene提供)的启动子。U: 非甲基化特异性引物PCR;M: 使用甲基化特异性引物的PCR。(C) 超甲基化GLS2级用BGS分析肝癌细胞株中的启动子。对来自2个肝癌细胞系和2个非肿瘤肝组织(Origene)的亚硫酸氢处理DNA的8个PCR产物克隆进行了测序。黑色和白色方块分别表示甲基化和非甲基化。(D) 超甲基化GLS2级MSP检测原发性肝癌启动子。采用MSP对21对原发性肝癌及其匹配的非肿瘤肝组织进行分析。代表性图像是样品#1-10的MSP结果。NT:非肿瘤肝组织;T: 肿瘤。