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图7

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PEDF通过PPARγ抑制PDGFR的表达。

(B类)PPARγ拮抗剂抑制PEDF对PDGFR-α和–β表达的抑制作用。用PEDF或34-mer与10µM GW9662或10µM G3335联合处理HSCT-6细胞48小时。收集细胞进行western blot分析。抗β-肌动蛋白抗体证实了等负荷。图中显示了三个独立实验的代表性斑点(面板下方)和SD密度分析(上图)**P(P)<0.0001与未经处理的细胞相比。(C类D类)合成PPARγ配体CGZ和RGZ对PDGFR-α/β表达的影响。用34-mer、5µM PPARγ配体或34-mer与CGZ或RGZ联合处理HSCT-6细胞48小时。收集细胞进行western blot分析。抗β-肌动蛋白抗体证实了等负荷。显示了三个独立实验的代表性印迹(C)和用SD(D)进行的密度计分析*P(P)与34米处理的细胞相比,<0.05**P(P)与34米处理的细胞相比,<0.02。(E类)PPARγsiRNA消除34-mer诱导的PDGFR下调。用PPARγsiRNA或对照siRNA转染HSC-T6细胞16小时,并在完全培养基中再恢复24小时。“模拟”表明细胞仅用转染试剂处理。治疗后,将HSC-T6和siRNA-转染的HSC-T4细胞暴露于34-mer中48h,然后收获用于western blot分析。(F类)BrdU脉冲标记分析。如上所述进行GW9662和siRNA预处理,然后PDGF(P)处理额外24小时,BrdU脉冲标记2小时。显示的变化代表三个独立实验(n=3个培养皿)的SD。

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