UPS抑制或UPS和自噬双重抑制诱导的TDP-43聚集体类似于人类疾病中的聚集体。（A） 未经处理的SH-SY5Y细胞的免疫细胞化学分析显示降解途径蛋白ubiquilin-1或-2（UBQLN）和p62以及K48-和K63连接形式的泛素（Ub）的扩散定位。比例尺：25µm。（B–E）在UPS抑制或UPS和自噬的联合抑制存在的情况下，用DOX诱导48小时，诱导表达HA–TDP-43的稳定SH-SY5Y系的免疫细胞化学分析。（B） 用DOX加蛋白酶体抑制剂MG132处理稳定的SH-SY5Y细胞后，HA–TDP-43 WT形成细胞质大聚集体（箭头）。这些聚集体对翻译后修饰（PTM）阳性，包括K48-和K63连接的泛素、泛素-1和-2以及p62。（C） DOX、MG132和自噬抑制剂3MA的联合治疗增强了HA–TDP-43 WT向大聚集体的募集，这与单独使用MG132治疗的标记物相同。（D） 在稳定的SH-SY5Y细胞中，经DOX加MG132处理48小时后，HA–TDP-43ΔNLS也形成了细胞质聚集体。如HA–TDP-43 WT所示，这些聚集物对K48和K63连接的泛素、泛素-1和-2以及p62呈阳性。（E） DOX加MG132和3MA的联合治疗并未显著改变HA–TDP-43ΔNLS向大聚集体的募集。B–E中图像底部一行的箭头表示为图像下方所示的强度剖面拍摄的截面。比例尺：10µm。
