单个细胞对指示的[Ca增量的反应总结2+]o(o)瞬时转染WT-CaSR或指示Ca突变的HEK293细胞2+-结合位点
用WT-CaSR或Ca瞬时转染HEK293细胞前1天,将其接种在盖玻片上2+结合相关CaSR突变体。48小时后,如“材料和方法”所述,用Fura-2加载细胞2+]o(o)记录了[Ca2+]我振荡开始或达到一个平台,分别称为起点和终点。对于没有我-Phe,在[Ca水平下记录频率(峰值/分钟)2+]o(o)大多数细胞(>50%)开始振荡,而对于5m的实验米
我-Phe,在相应的[Ca水平上分析频率2+]o(o)在没有我-苯丙氨酸。具体来说,在3.0 m处研究了频率米[加利福尼亚州2+]o(o)对于WT,12.5 m米[加利福尼亚州2+]o(o)对于E297I,10.0 m米[加利福尼亚州2+]o(o)对于D215I和D398A/E399I,4 m米[加利福尼亚州2+]o(o)用于E224I和5.0 m米[加利福尼亚州2+]o(o)用于E353I。共从三个独立实验中分析了30多个细胞。数值为平均值±S.E.NA,不可用。